研究背景:钙敏感受体（CaSR）属于细胞膜表面鸟嘌呤核苷酸调节蛋白（G蛋白）偶联受体（GPCRs）,广泛表达在调节钙平衡的组织器官中,维持机体的钙稳态。CaSR也在中枢神经系统大部分脑区表达,并具有调节神经元突起生长和少突胶质细胞分化等功能。本实验室前期研究证实CaSR基因敲除(CaSR^-/-)小鼠存在高钙、高甲状旁腺素血症,并在出生后的发育过程中出现脑内神经元、星形胶质细胞和少突胶质细胞分化、成熟障碍等表型。为了排除了体内高钙、高甲状旁腺素血症的干扰,进一步探讨CaSR基因缺失所导致的小鼠脑发育障碍的确切机制,我们分离CaSR^+/+和CaSR^-/-新生小鼠室管膜下区（SVZ）的神经干细胞（NSCs）进行体外培养,研究CaSR基因缺失对NSCs增殖、凋亡、迁移和分化的影响及机制。研究方法和内容:（1）应用神经球检测法测定CaSR^+/+和CaSR^-/-NSCs自我更新能力;（2）采用BrdU掺入法测定不同的细胞外钙浓度( [Ca²⁺]0 )下,两种基因型的NSCs增殖能力;（3）通过Hoechst染色和TUNEL法观察NSCs在该过程中的凋亡情况;（4）检测神经干细胞球贴壁后放射状迁移的距离,从而比较两种基因型的NSCs迁移能力;（5）1%胎牛血清诱导NSCs分化6天、10天后,应用免疫细胞化学方法测定两种基因型的神经元、星形胶质细胞和少突胶质细胞形态和数量的变化;（6）Western blot检测CaSR缺失对NSCs增殖和分化过程中ERK1/2、JNK磷酸化水平的影响。结果:（1）在基础状态1mM [Ca²⁺]0下,CaSR^+/+组与CaSR^-/-组NSCs自我更新及增殖能力无差异。（2）在生理范围[Ca²⁺]0 （1-3 mM）内,随着[Ca²⁺]0升高,CaSR促进NSCs增殖,抑制凋亡,促进NSCs存活;当[Ca²⁺]0超过生理范围时（ 5 mM ）,CaSR促进NSCs增殖、抑制NSCs凋亡的作用减弱。在NSCs增殖过程中,CaSR^+/+组ERK1/2的磷酸化水平高于CaSR^-/-组。（3）CaSR基因缺失明显抑制NSCs迁移。（4）CaSR基因缺失延迟NSCs向神经元、星型胶质细胞和少突胶质细胞分化,并抑制神经元和少突胶质细胞突起的生长。（5）NSCs分化2、6天时CaSR^+/+组ERK1/2磷酸化水平比CaSR^-/-组高,但第10天CaSR^-/-组ERK1/2磷酸化水平较CaSR^+/+组高。在上述时间点,两种基因型NSCs的JNK磷酸化水平无明显差异。结论:上述结果提示了CaSR参与调控离体NSCs增殖、凋亡、迁移和分化等基本生物学特性,并通过ERK1/2信号通路调节NSCs增殖和分化过程。