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狂犬病是有极高致死率的中枢神经系统急性传染性疾病,它由狂犬病毒感染所导致,至今还没有切实有效的治疗方法,只能通过注射狂犬病疫苗预防狂犬病发生。目前,狂犬疫苗为培养细胞制备病毒收获液,经病毒收获液浓缩、灭活、纯化、配制、冻干等工艺制备的全病毒灭活疫苗,所用疫苗毒株主要为国外分离的PV株、PM株、Flury株和国内分离的aG株、CTN株,所用细胞基质主要有原代地鼠肾细胞、Vero细胞、MRC-5人二倍体细胞等,上游生产工艺主要有转瓶培养工艺,细胞工厂生产工艺和生物反应器生产工艺,纯化工艺主要有分子筛层析纯化、离子交换纯化等。本文主要进行了 aG株狂犬病毒RNA的提取、PCR扩增、测序及序列分析,确认其同其他疫苗株及检定用攻击毒株的遗传亲缘距离,较高微载体浓度的狂犬病毒生物反应器培养条件的试验,分子筛、阴阳离子交换纯化条件的摸索试验和初步过敏性安全评价试验,确定了以国内分离狂犬病毒株、市售培养基高微载体密度生物反应器病毒培养方法、不经DNA酶处理的纯化方法构成人用狂犬疫苗制备工艺。1、狂犬病病毒RNA提取、测序及序列比对分析。2、艾本德NBS Cellgen 310 7.5L生物反应器狂犬病毒培养条件的选择。3、狂犬病疫苗灭活纯化工艺的摸索。4、狂犬病疫苗样品的初步安全性有效性检定。通过本次的研究,确定了狂犬病毒的遗传谱系情况,以及狂犬病病毒培养和狂犬病疫苗的纯化,并且进行了初步检定,确定了狂犬病疫苗的制备工艺,为研发狂犬病疫苗的工艺优化提供了方向和依据。