【摘 要】
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背景:目前可用的结肠癌治疗方法,包括手术,化疗,放疗和免疫治疗,但尚未达到令人满意的疗效率。结肠癌原位肿瘤的五年生存率为90.2%,而伴转移性肿瘤的患者五年生存率仅14.3%。最近,中西医结合治疗在肿瘤的临床研究中取得了突破性进展,其有利于改善癌症患者的生活质量和延长生存期。当归补血汤作为中医经方,传统上用于补益气血,最近已运用于癌症的治疗。目的:探讨当归补血汤能否通过调控细胞周期抑制结肠癌转移性
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背景:目前可用的结肠癌治疗方法,包括手术,化疗,放疗和免疫治疗,但尚未达到令人满意的疗效率。结肠癌原位肿瘤的五年生存率为90.2%,而伴转移性肿瘤的患者五年生存率仅14.3%。最近,中西医结合治疗在肿瘤的临床研究中取得了突破性进展,其有利于改善癌症患者的生活质量和延长生存期。当归补血汤作为中医经方,传统上用于补益气血,最近已运用于癌症的治疗。目的:探讨当归补血汤能否通过调控细胞周期抑制结肠癌转移性肿瘤生长。方法:建立结肠癌小鼠模型,将小鼠结肠癌CT-26细胞注射到BALB/c小鼠右腋窝皮下,产生原发性肿瘤,5天后在左腋窝注射,产生转移性肿瘤。随后将小鼠随机分为四组,切除组（R）,切除原发性肿瘤并接受dd H 2O作为治疗;第二组是不切除组（NR）,原发性肿瘤未切除并给予dd H2O作为治疗。第三组为当归补血汤I组（DBD I）,在原发肿瘤切除前7天给予当归补血汤治疗后切除;最后一组为当归补血汤II组（DBD II）,原发肿瘤切除后24小时后予以当归补血汤治疗,各组治疗14天。测量小鼠结肠癌转移瘤的重量和体积,使用蛋白质印迹,免疫组织化学检测p53,p27和PCNA蛋白的相对表达,使用RT-q PCR检测p16,c-myc m RNA相对表达。结果:肿瘤生长曲线表明:NR,DBDI/II组转移瘤生长速率较R组降低;与R组（1036.24±286.71）比较,转移瘤体积在NR组（862.43±277.57）、DBDI组（758.95±216.40）、DBDII组（598.82±63.58）依次降低;与R组比较,转移瘤质量在DBDI/II组明显减轻（p＜0.05,p＜0.001）,NR、DBDI/II组抑瘤率分别为25.10%,44.53%,74.26%。Kaplan Meier生存分析结果提示:各组总生存率分别为R 0.48,NR 0.61,DBD I 0.75,DBD II 0.88,各组对应死亡率分别为0.52,0.39,0.25 and 0.12,尽管DBD II组小鼠总体生存率最高,死亡率最低,但与其他组比较无统计学差异。western blot结果显示:与R组比较,NR组,DBD I组p53表达上调,DBD II组表达明显上调（p＜0.005）;与NR组比较,R组p53表达下调（p＜0.001）;与R组比较,NR组,DBD I组p27表达上调,DBD II组表达明显上调（p＜0.005）;与NR组比较,R组p27表达下调（p＜0.005）.RT-q PCR结果提示:与R组比较,NR组,DBD I组癌基因cmyc m RNA表达下调,DBD II组表达明显下调（p＜0.005）;与NR组比较,R组上调c-myc m RNA表达(p＜0.001;与R组比较,NR组,DBD I组上调p16 m RNA表达,DBD II组表达显著上调（p＜0.001）;与NR组比较,R组下调p16 m RNA表达（p＜0.001）.免疫组化结果显示:各组中R组PCNA阳性百分比最高,NR组（P＜0.05）,DBD I/II组PCNA阳性百分比较R组降低（P＜0.005）.结论:围手术期黄芪和当归联合使用（当归补血汤）抑制原发瘤切除后转移瘤生长,减轻转移瘤重,原发瘤切除后给予黄芪,当归治疗能取得更佳疗效.其机制可能与上调促凋亡蛋白p53,细胞周期阻滞蛋白p27表达,下调癌基因c-myc,上调细胞周期阻滞p16 m RNA表达,诱导细胞周期阻滞相关.
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