艾滋病(Acquired Immunodeficiency Syndrom，AIDS)至今仍在全球范围内迅速蔓延，依然严重威胁人类健康和生命安全，因此开发新型抗艾滋病病毒药物寻找抗病毒作用新靶点是目前治疗艾滋病病毒感染的研究重点和方向。本课题旨在通过细胞水平药效学评价与多种生物学实验技术对课题组前期获得的杂多酸化合物KA-1和中国传统中药材冬虫夏草以及主要活性成分虫草素(cordycepin)进行体外毒性和抗病毒活性的分析探讨。　　对杂多酸化合物KA-1的研究发现KA-1具有剂量依赖性的体外抗病毒作用(IC50为0.073±0.045μg/mL)，与齐多夫定AZT具有协同作用。应用表面等离子共振(SPR)技术检测发现KA-1与Vif蛋白、整合酶和gp41蛋白具有良好的亲和力;体外逆转录酶、整合酶、蛋白酶活性检测实验测定KA-1对整合酶的抑制作用较显著;通过荧光检测、Western blot实验发现KA-1可以降低外源性Vpu蛋白的表达，并对Vpu蛋白降解BST-2(THN)蛋白作用有一定的抑制，但对Vif蛋白的表达无明显影响;利用病毒-细胞融合实验证实KA-1特异性靶向包膜蛋白，并能抑制gp41蛋白核心结构的形成。　　对虫草提取物的研究发现虫草5种不同部位浸提物（新鲜虫体、新鲜子座、新鲜全草、干燥虫体和干燥子座）均具有剂量依赖性的抗病毒作用。应用SPR、体外逆转录酶活性检测等实验发现虫草5种浸提物与Vif蛋白、逆转录酶均有良好的亲和力;均具有体外抗逆转录酶活性，且相比干燥虫草，新鲜虫草的抗逆转录酶活性较显著。对虫草的有效活性成分虫草素的进一步研究发现，虫草素体外对HIV-1R3A野生毒株（IC500.507±0.07μg/mL）和HIV-1B亚型Env包膜的假毒株（IC500.89±0.15μg/mL）均具有良好的抗HIV-1病毒活性。应用SPR，Western blot等实验检测发现其与Vif蛋白、逆转录酶均具有良好的亲和力;虫草素可抑制Vif蛋白降解A3G蛋白的作用，对A3G蛋白的表达具有一定的保护作用，但对Vif蛋白的表达无明显影响;体外酶活性检测等实验证实虫草素对逆转录酶、整合酶的活性均具有抑制作用，但对蛋白酶活性无明显影响。　　综上所述，研究发现杂多酸化合物KA-1在体外具有良好的抗HIV-1病毒活性，且与临床核苷类逆转录酶抑制剂联合用药具有协同作用，其作用机制可能与抑制整合酶活性、阻止gp41蛋白核心结构的形成有关。冬虫夏草在体外具有良好的抗HIV-1病毒活性，且相比干燥虫草，新鲜虫草的抑制作用较显著。表明虫草的有效抗病毒成分主要存在于新鲜虫草部分，且容易在干制过程中损失。其药效成分虫草素在体外对HIV-1R3A野生毒株和HIV-1B亚型Env包膜的假毒株具有良好的抗病毒活性，机制与抑制逆转录酶和整合酶活性有关，且虫草素对Vif蛋白降解A3G蛋白作用也有一定的抑制作用。本研究阐明了KA-1和虫草的体外抗病毒活性和初步作用机制，将为新型抗艾滋病病毒药物的研发提供了良好的实验基础。