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绿盲蝽Apolygus lucorum,属于半翅目,盲蝽科,是一种重要的田间害虫。近年来,随着转Bt抗虫棉的广泛栽植,以绿盲蝽为主的田间刺吸式次要害虫大规模发生,给农业生产造成了严重的经济损失。绿盲蝽具有多食性和寄主转移为害习性,其依靠自身敏感的嗅觉味觉系统感知纷繁复杂的外界信号,并作出相应的化学感受行为。本研究针对绿盲蝽足部的化学感受功能展开以期进一步阐明绿盲蝽的化学通讯行为调控机制。主要研究结果如下:1.绿盲蝽雌雄成虫足部感器主要分布在股节、胫节和跗节。扫描电镜结果显示,感器类型无雌雄二型性现象。绿盲蝽足部表面有4种类型的感器,包括:毛形感器sensilla trichodea(亚型:长直毛形感器long straight sensilla trichodea,长曲毛形感器long curved sensilla trichodea)、锥形感器sensilla basiconca(亚型:中长锥形感器medium-long sensilla basiconca,短锥形感器short sensilla basiconca)、刺形感器sensilla chaetica(亚型:刺形感器1,刺形感器2,刺形感器3)和蒲姆氏鬃毛B?hm bristles。感器类型在绿盲蝽的雌雄成虫的前、中、后足上基本一致,不同的感器类型分布情况相同,但是数量存在差异,后足上分布的感器数量最多,前足上分布的感器数量最少。透射电镜结果表明,不同的感器中含有不同数量的神经元。2.通过Illumina Hiseq TM 2500二代测序平台,对绿盲蝽雌雄成虫前、中、后足六个样本分别进行转录组测序。从绿盲蝽足部转录组中筛选出31个化学感受相关基因,包括20个气味结合蛋白基因OBP、8个化学感受蛋白基因CSP、1个嗅觉受体基因OR、1个离子型受体基因IR、1个感觉神经元膜蛋白基因SNMP。与触角转录组相比,其中CSP9、10、12、16、17、IR21a和SNMP2a是新鉴定出来的基因。组织表达谱分析显示:OBP9、OBP31、CSP3在雄虫前足高表达,OBP2、OBP8、OBP17、CSP9、CSP16在雌虫前足高表达,OBP3、OBP11、OBP19和OBP35在雌雄前中足高表达,OBP18在雌雄后足高表达,其余基因在雌雄前中后足表达无明显差异。3.对两个绿盲蝽足部高表达的AlucOBP3和AlucOBP35进行了体外克隆、表达和纯化。荧光竞争结合实验分析了2个重组蛋白与122种气味化合物的结合情况。结果表明,AlucOBP3和AlucOBP35二者的结合特性相似,均可以结合挥发性物质及非挥发性物质。两个重组蛋白都可以结合绿盲蝽驱避剂组分二甲基二硫醚,暗示两个蛋白参与绿盲蝽近距离趋避行为。另外,OBP35还可以结合性信息素组分四氧代反二己烯醛(雌虫体表提取物),表明OBP35可能参与绿盲蝽的近距离求偶。4.采用足部电位技术(ELG)测定了绿盲蝽足部与41种候选配体化合物的电生理反应,结果显示,绿盲蝽足部对乙酸叶醇酯、(E)-乙酸-2-己烯-1-醇酯、丁酸反-2-己烯酯、反-2-己烯酸四种化合物存在电生理反应。当标样浓度0.1μg/μL和10μg/μL时绿盲蝽足对性信息素组分丁酸反-2-己烯酯反应最大,当标样浓度为100μg/μL时对寄主植物挥发物(E)-乙酸-2-己烯-1-醇酯反应最大,进一步从电生理水平证实绿盲蝽足部参与其化学感受识别过程。