三株真菌次级代谢产物研究

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本文以三株真菌为研究对象,其中两株为拟盘多毛孢属植物内生真菌,一株为植物病原菌,进行化学成分及生物活性研究。首先将三株真菌进行大量发酵,发酵产物用硅胶柱色谱,SephadexLH-60,SephadexLH-20凝胶,制备型薄层层析,HPLC等方法进行分离纯化,再结合现代波谱学方法1H-NMR,13C-NMR,HMBC,HSQC,1H-1HCOSY,NOESY,MS,IR等手段进行波谱解析,最后对部分化合物进行抗肿瘤,抗氧化活性测试。本实验共分离鉴定出29个化合物,其中4个为新化合物。  从牛心果内生真菌Pestalotiopsiscalabae的液体发酵提取物中分离鉴定出12个化合物,其中2个为新化合物。  通过1H-NMR,13C-NMR等波谱信息,并查阅相应文献确定化合物结构分别为:ergosta-4,6,8(14),22-tetraen-3-one(2-1-1),(?)-(4S,8S)-foedanolide(2-1-2),(+)-(4R,8R)-foedanolide(2-1-3),4-羟基苯甲酸(2-1-4),1’,2’-epoxy-3’,4’-didehydropenicillide(2-1-5),丁二酸(2-1-6),pestalotin(2-1-7),4-(2-hydroxypentyl)-4-methoxy-3,7-dioxabicyclo[4.1.0]heptan-2-one(2-1-8),hydroxypestalotin(2-1-9),2,6-bis[(1R)-1-hydroxyisobutyl]-1H,5H-pyrrolo[2,3-b]indole-4,8-dione(2-1-10),6-(1,4-dihydroxypentyl)-4-ethoxy-5,6-dihydro-2H-pyran-2-one(2-1-11),6-(1,3-dihydroxypropyl)-4-methoxy-5,6-dihydro-2H-pyran-2-one(2-1-12)。其中化合物2-1-11,2-1-12为新化合物。  从番石榴内生真菌Pestalotiopsiscalvispora的固体发酵粗提物中分离鉴定11个化合物,其中2个为新化合物。所得化合物分别为:ergosta-7,22-dien-3β,5α,6α-triol(cerevisterol)(2-2-10),3β-羟基-麦角甾-5,7,22-三烯(2-2-1),3β-羟基-5α,8α-过氧化麦角甾-6,22-二烯(2-2-8),对羟基苯乙基乙酸酯(2-2-2),对羟基苯甲醛(2-2-3),邻-羟基苯乙醇(2-2-6),对羟基苯乙醇(2-2-7),对羟基苯甲醇(2-2-9),4-羟基-4-甲基四氢-2H-吡喃-2-酮(2-2-11),4,6-dihydroxy-3,8-dimethyl-2H-chromen-2-one(2-2-4),4-hydroxy-3-(1-hydroxyethyl)-5,7-dimethylbenzofuran-2(3H)-one(2-2-5)。其中2-2-4,2-2-5为新化合物。从大丽轮枝菌VerticilliumdahliaeKleb.的液体发酵提取物中分离鉴定出6个化合物,均为该种中首次发现。化合物分别为:吲哚-3-甲醛(2-3-1),4-羟基苯甲酸(2-3-2),1H-吲唑(2-3-3),2-(2-羟基苯基)乙酸(2-3-4),2-(1H-吲哚-3-基)乙酸(2-3-5),对甲基苯甲酸(2-3-6)。  采用MTT法对部分化合物进行抗肿瘤活性测试显示,化合物2-1-10对Hela细胞株有抑制活性,IC50与阳性药物顺铂相比稍弱。2-1-7在48h后,对Hela有抑制活性。2-2-2,2-2-3对Hela细胞系抑制活性活性随时间递增,经结构修饰或可提高活性。化合物2-2-7,2-2-8活性不佳。化合物2-1-10对U251细胞株有抑制活性,IC50与阳性药物顺铂相比稍弱。2-1-7、2-1-9在72h时,对U251有抑制活性。  采用DPPH法测试部分化合物抗氧化活性,阳性对照BHA随浓度变化抑制率有明显变化,自由基最高清除率可达82.6%。化合物2-3-4,2-1-5,2-3-1有抗氧化活性,其中2-3-4较强,最高可达50.0%,但低于BHA。
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