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目的:本实验通过对比观察治疗组与模型组间,血管性痴呆大鼠(Vascular Dementia, VD)经过脑缺血再灌注后,海马CA1区APP、AVP、Aβ等各指标的变化,探索电针干预下大鼠脑内AVP、Aβ在神经突触传递效率的作用。此外,比较针疗1组(AVP V1受体阻滞剂+电针)、针疗2组(单纯电针)中AVP、Aβ等指标的不同,同时结合行为学结果,探寻电针干预下AVP拮抗Aβ的具体作用靶点。方法:将120只成年雄性的SPF级SD大鼠按照随机数表法随机分为正常组、假手术组、模型组、西药组、针疗1组、针疗2组。实验造模方法采用改良后的Pulsinelli’s四血管阻断(four-vessel occlusion,4-VO)法:先用电凝永久性阻断大鼠双侧椎动脉,再用微血管夹可逆性地同时夹闭双侧颈总动脉,通过此方法可成功制作血管性痴呆大鼠的动物模型,造成大鼠的空间记忆、学习能力下降等行为学改变,然后用水迷宫筛选出合格血管性痴呆大鼠。此外,针疗1组于海马CA1区注射AVP V1受体阻滞剂。治疗时西药组:吡拉西坦悬浊液灌胃,针疗1组及针疗2组使用同样的电针治疗。观察不同的治疗方法下血管性痴呆大鼠各指标的改变,包括用Morris水迷宫作行为学测试,Western Blot、荧光PCR法测海马区APP、AVP、Aβ1-40、Aβ1-42的基因与蛋白表达,ELISA检测α/β/γ三种分泌酶含量的变化。结果:1、Morris水迷宫结果:定位航行试验:与其余各组比较,模型组的平均逃避潜伏期明显延长,比较具有显著性差异(P<0.01);与模型组比较,治疗组(西药组、针疗1组、针疗2组)的平均逃避潜伏期明显缩短,比较均有显著性差异(P<0.01)。治疗组内进行两两组间比较,针疗2组平均逃避潜伏期的缩短较西药组明显,比较具有统计学意义(P<0.05),但针疗1组与西药组、针疗1组与针疗2组,此两对组间比较无明显统计学意义。空间探索试验:与其余各组比较,模型组120秒内跨越原平台次数成绩最差,比较具有显著性差异(P<0.01);与模型组比较,治疗组(西药组、针疗1组、针疗2组)120秒内跨越原平台次数增加,比较具有显著性差异(P<0.01);但治疗组内进行两两组间比较,三组之间差异无明显统计学意义。2、Western Blot法检测结果A β1-40:与模型组比较,三组治疗组的Aβ1-40蛋白表达量明显减少,比较具有显著性差异(P<0.01);三组治疗组进行两两组间比较,针疗2组Aβ1-40蛋白表达量减少较其他两组明显,比较有统计学意义(P<0.05),但西药组与针疗1组比较无统计学意义。Aβ1-42:与模型组比较,针疗组(针疗1组、针疗2组)的A β1-42蛋白表达量明显减少,比较具有显著性差异(两者均P<0.01)但西药组与模型组对比无统计学差异(P>0.05);三组治疗组内进行两两组间比较,针疗组(针疗1组、针疗2组)Aβ 1-42蛋白表达含量减少均较西药组明显,比较具有统计学意义(P<0.05):但两组针疗组之间对比无统计学意义。AVP:与模型组比较, 三组治疗组的AVP蛋白表达量明显上升,比较均具有显著性差异(P<0.01);三组治疗组内进行两两组间比较,针疗2组的AVP蛋白表达量最高,较其余两组有统计学意义(两者均P<0.01);而针疗1组AVP蛋白表达量最低,对比有显著性差异(两者均P<0.01)。APP:与模型组比较,三组治疗组的APP蛋白表达量明显下降,比较有显著性差异(P<0.01);三组治疗组内进行两两组间比较,针疗组(针疗1组、针疗2组)APP蛋白表达含量减少较西药组明显,比较有统计学意义(P<0.05),但两组针疗组的组间比较无明显统计学意义。3、荧光PCR法检测结果Aβ1-40:与模型组比较,三组治疗组的Aβ1-40基因表达水平明显下降,比较有显著性差异(两者均P<0.01);三组治疗组内进行两两组间比较,针疗2组的Aβ1-40基因表达水平较其他两组依然有下降,比较均有统计学意义(P<0.05),由其与西药组的对比结果在统计学意义更为明显(P<0.01),但西药组与针疗1组的对比无统计学意义。A β1-42:与模型组比较,三组治疗组的A β1-42基因表达水平明显下降,比较有显著性差异(P<0.01);三组治疗组内进行两两组间比较,针疗组(针疗1组、针疗2组)的A β1-42基因表达水平下降较西药组明显,比较均具有显著性差异(P<0.01),但两组针疗组的组间比较无统计学意义。AVP:与模型组比较,三组治疗组的AVP基因表达水平明显上升,比较有显著性差异(P<0.01);三组治疗组内进行两两组间比较,针疗2组的AVP基因表达水平最高,比较具有显著性差异(P<0.01);而针疗1组的AVP基因表达水平最低,与其余两组相比具有统计学意义(P<0.01)。APP:与模型组比较,三组治疗组的APP基因表达水平明显下降,比较有显著性差异(P<0.01);三组治疗组内进行两两组间比较,针疗2组的APP基因表达水平最低,其次为针疗1组,西药组为最高,三者相互两两比较均有显著性差异(P<0.01)。4、Elisa法检测结果a-分泌酶:与模型组比较,三组治疗组的α-分泌酶含量均明显增加,比较有显著性差异(P<0.01);三组治疗组内进行两两组间对比,与西药组比较,针疗组(针疗1组、针疗2组)的α-分泌酶含量明显增加,比较有统计学意义(P<0.05),其中,针疗2组的α-分泌酶含量的增加与其余两组对比则差异更为显著(P<0.01)。β-分泌酶:与模型组比较,三组治疗组的β-分泌酶含量明显减少,比较有显著性差异(P<0.01);三组治疗组内进行两两组间比较,针疗组(针疗1组、针疗2组)β-分泌酶含量减少均较西药组明显,比较有统计学意义(P<0.05),但两组针疗组间对比并无明显差异。Y-分泌酶:与模型组比较,三组治疗组的γ-分泌酶含量明显减少,比较均具有显著性差异(P<0.01);三组治疗组内进行两两组间比较,Y-分泌酶含量差异并无统计学意义。结论:1、电针“百会”、“大椎”穴可以改善血管性痴呆大鼠学习记忆能力,表现为逃避潜伏期的缩短,机制可能与电针能降低血管性痴呆大鼠海马区APP、A β1-40、Aβ1-42的基因及蛋白表达水平及β、γ-分泌酶含量,并同时提高AVP的基因及蛋白表达水平及α-分泌酶含量有关。2、自泌AVP以Aβ拮抗剂的形式有效阻断或减弱Aβ对海马神经元的毒害作用,具体表现为:AVP能以A β1-40、A β1-42拮抗剂的形式抑制对神经元的损害,在Aβ降解与清除上有积极作用;同时,虽然其并无直接抑制Aβ单体形成作用,但能通过提高α-分泌酶含量,对APP减少生成Aβ有积极作用,继而对血管性痴呆病理上有所改善。