论文部分内容阅读
乙型肝炎病毒（Hepatitis B virus, HBV）感染是严重威胁人类健康的重要的疾病之一，可以引起急慢性乙型肝炎，与肝硬化和肝癌的发生有着密切关系。至今为止还没有令人满意的治疗方法。全球大约有3.5亿人是乙肝患者，我国又是HBV感染的高发流行区，约占总人数的9.75%。慢性乙型肝炎是引起肝硬化及肝癌的重要原因。慢性乙型肝炎5年内约有8%-20%发展为肝硬化，部分会转化为肝细胞癌。当前我国对于HBV慢性感染的治疗，目前尚无大的突破，依然处于探索阶段。乙型肝炎（Hepatitis B,HB）的发病过程目前尚未研究清楚。有研究发现细胞凋亡参与了HB的发病过程。多篇文献报道内质网应激（endoplasmic reticulumstress，ERS）作为一条新的细胞凋亡信号传导通路可启动细胞凋亡，近年来与之相关的研究逐渐增多成为研究的热点受到人们的关注。钙网蛋白（calreticulin，CRT)是参与内质网应激的重要分子伴侣，具有很高的钙结合容量，是内质网的Ca2+库，参与胞内钙信号调控；具有调节Ca2+稳态、协助蛋白质正确折叠、细胞凋亡的作用，在内质网应激径路凋亡中有重要作用，多种疾病的发生都与之相关。本实验中我们采用免疫印迹(Westtern Blot)和逆转录-聚合酶链式反应(RT-PCR)，观察了CRT在HBV慢性感染时的表达变化，目的在于了解这个指标在HB的发病过程中的作用，为HBV慢性感染的基础研究以及临床治疗提供一定的实验依据。检测的结果显示，与正常对照组相比，实验组(HBV慢性感染组)的CRT表达出现明显上调。此外，为了进一步检测凋亡，我们同时检测了凋亡相关基因Bcl-2，Bax的表达情况，检测结果显示，在HBV慢性感染组，Bcl-2的表达呈现降低趋势，Bax的表达呈现增加趋势，更重要的是，代表细胞进入凋亡的Bax/Bcl-2出现了明显的上调，这一结果说明了在实验组发生了凋亡。提示内质网分子伴侣CRT通过内质网应激介导了内质网径路细胞凋亡的发生，这也证实了内质网分子伴侣CRT可能在HB发病中起关键枢纽作用，参与了HB的发病过程。HBV慢性感染导致了CRT表达的增加，并最终介导了细胞凋亡的发生，为证实细胞凋亡参与HB发病提供了实验依据。随着研究的不断深入，能为最终寻求到有效的免疫治疗策略，消除HBV慢性病毒感染提供新的研究思路。