产PSP链状亚历山大藻共附生细菌多样性及藻菌关系研究

来源 :上海海洋大学 | 被引量 : 4次 | 上传用户:yuhuafenghao
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有害赤潮(harmful algal bloom,HABs)是全球性的严重海洋生态灾害及重大环境热点问题,其产生的赤潮毒素经食物链传递严重威胁人类生命安全与健康。其中,麻痹性贝类毒素(Paralytic Shellfish Poison,PSP)是已知贝类毒素中分布最广、毒性最强、对人类威胁最严重。但PSP来源问题仍悬而未决,藻菌关系是揭示PSP产生机制的关键,而解析产毒赤潮甲藻来源共附生菌多样性研究是解析藻菌关系的必要前提。本研究选取典型赤潮甲藻-链状亚历山大藻(LZT09)为研究材料,通过免培养环境微生物高通量测序分析,解析了LZT09来源共附生菌的物种种类及其丰度。结果表明,LZT09来源共附生菌包括6个门,其中优势门4个,包括变形菌门(Proteobacteria,53.9%),拟杆菌门(Bacteroidetes,27.5%),蓝藻门(Cyanobacteria,16.8%)及螺旋菌门(Spirochaetae,1.5%)。包括34个属,其中优势属(>5%)包括15个,分别为Cryomorphaceae科未知属(22.8%),Cyanobacteria纲未知属(16.8%),Saccharospirillum(14.6%),Rhodobacteraceae科未知属(7.9%)与Maricaulis(5.6%),其中未知属比例高达50.6%,表明链状亚历山大藻(LZT09)蕴含发掘特殊生境微生物新种的巨大潜力。通过微生物纯培养技术分离获得12株可培养细菌,从中筛选发现菌株LZ-16-1产dcneo STX。对可能的微生物新种LZ-7进行了多相分类学鉴定。结果表明,菌株LZ-7为革兰氏阴性菌,短杆,需氧,最适生长盐度6%(w/v),最适生长温度28℃,最适生长pH 7。主要极性脂组分包括磷脂酰甘油(PG)、磷脂酰乙醇胺(PE)及卵磷脂(PC)。主要脂肪酸组分包括C18:1ω7c(65.33%),其次是C16:0(9.27%),C18:0(7.56%),C18:1ω7c11-metyl(5.6%),C17:0(3.83%),C12:0-3OH(3.75%),C12:1-3OH(2.20%);主要醌为Q10。菌株16S rRNA基因测序及比对结果表明,LZ-7与Ponticoccus litoralis CL-GR66T(98.37%)同源性最高。因此,将LZ-7鉴定为Ponticoccus属的一个新种,命名为Ponticoccus sp.LZ-7。藻菌关系分析实验结果表明,通过30μg/mL头孢噻肟钠和50μg/mL万古霉素联合处理可基本上去除链状亚历山大藻(LZT09)共附生菌。加入抗生素处理与原始藻所产PSP毒素种类无变化,但其PSP产量较原始藻降低约78%。
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