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目的：内毒素休克(ES)是临床常见的危重病症，持续ES可导致多器官功能障碍甚至多器官功能衰竭，死亡率极高。ES时常可发生脑功能障碍，但其机制尚未完全明了。已知氧化应激是ES时组织损伤的主要机制之一。过量产生的氧自由基、一氧化氮（NO）及其与超氧阴离子自由基（）的反应产物过氧亚硝基阴离子（ONOOˉ）可使脂质、蛋白质、核酸等生物大分子发生氧化、硝基化，引起组织细胞功能代谢改变和结构损伤。NO并介导了脑组织缺血缺氧时兴奋性氨基酸的神经毒作用。已有研究表明，八肽胆囊收缩素（CCK-8）具有抗ES作用，可改善内毒素引起的血管反应性降低，减轻组织损伤，但CCK-8对ES时脑组织损伤是否有影响尚未见报道。本研究通过静脉注射内毒素的主要活性成分脂多糖（LPS）建立ES模型，观察CCK-8对脑组织损伤的影响，并初步探讨其作用机制。方法：实验用日本大耳白兔和Sprague Dawley（SD）大鼠。将家兔经耳缘静脉注射25%乌拉坦（1g/kg）麻醉后，分离左颈总动脉用于监测平均动脉压（MAP）, 分离右颈静脉用于注药。将动物随机分为4组，每组8只：①对照组：注入等量生理盐水；② LPS组：注入LPS（8 mg/kg，8 mg/ml），LPS注入后出现MAP显著下降为ES 模<WP=4>型；③ CCK-8+LPS组：注入LPS前30 min注入CCK-8（15μg/kg,1 mg/ml）；④丙谷胺（Pro）+LPS组：注入LPS前30 min注入Pro（1 mg /kg，1 mg/ml），Pro为非选择性CCK受体拮抗剂。监测并描记注药前和最后一次注药后30min、1h、1.5h、2h、3h、4h、5h MAP。于注药前和注药后1h、3h、5h从颈总动脉插管取血液，5h放血处死动物取脑组织（大脑皮层和海马），制备血浆及组织匀浆，检测丙二醛（MDA）含量和超氧化物歧化酶（SOD）活性，NO含量和一氧化氮合酶（NOS）活性。光镜、电镜观察脑组织中上述区域的形态学变化。SD大鼠经腹腔注射10%水合氯醛（350mg/kg）麻醉后，经舌下静脉注药。将动物随机分为4组，每组3只：①对照组：注入等量生理盐水；② LPS组：注入LPS（8 mg/kg）；③ CCK-8+LPS组：注入LPS前30 min注入CCK-8（40μg/kg）；④Pro+LPS组：注入LPS前30 min注入Pro（1 mg /kg）。注药后6h断头处死动物取脑组织，免疫组织化学染色检测诱导型一氧化氮合酶（iNOS）和神经型一氧化氮合酶（nNOS）在脑组织中的表达和分布。数据用均数±标准差（±s）表示。单因素方差分析（one-way ANOVA）进行组间比较，有显著差异者用最小显著差法（LSD）进行两两比较，以P <0.05为有显著差异。结果：LPS注入后30min，家兔的MAP （10.79±1.42kPa）明显低于对照组(13.43±2.44kPa), P<0.01; 此后持续下降， 5h降至8.10±1.61kPa，各时间点MAP均明显低于对照组（P<0.01）。CCK-8+LPS组与<WP=5>LPS组相比，30min时其MAP略有升高，但无显著性差异，1.5h后各时间点MAP明显升高（P<0.05，P<0.01）。Pro+LPS组与对照组相比，其 MAP显著下降（P<0.01）；与LPS组相比表现为进一步下降趋势，但无统计学意义。与对照组相比，LPS组1h、3h、5h血浆中 NO含量和NOS活性明显升高（P<0.05，P<0.01），SOD活性减低（P<0.01），3h、5h MDA含量明显升高（P<0.05）。CCK-8+LPS组相应时间点的NO、MDA含量和NOS活性显著低于LPS组（P<0.05, P<0.01）， 3h、5h的SOD活性显著高于LPS组（P<0.05）；与对照组相比无明显差异。Pro+LPS组1h血浆中MDA水平较LPS组显著升高（P<0.05）。5h后检测脑组织中NO、MDA含量和NOS、SOD活性，结果显示：LPS组大脑皮层和海马中NO、MDA含量和NOS活性均较对照组明显升高（P<0.05，P<0.01）；SOD活性则显著下降（P<0.01）。与LPS组相比，CCK-8+LPS组NO、MDA含量和NOS活性显著降低（P<0.05，P<0.01），与对照组水平较为接近；SOD活性明显升高（P<0.05）。Pro+LPS组与LPS组相比，其大脑皮层中MDA含量显著增加（P<0.05），NO含量、NOS活性和SOD活性分别有进一步升高和降低的趋势；海马中NO含量、NOS活性及MDA含量明显升高(P<0.05，P<0.01), SOD活性表现为降低的趋势。光镜和电镜结果表明，LPS组家兔脑组织呈明显水样变性，神经元、神经纤维、血管周围水肿，CCK-8可一定程度上减轻脑组织以上病理性变化，Pro则进一步加重该<WP=6>种形态学改变。免疫组织化学染色结果显示，对照组大脑皮层和海马部位可见神经元胞浆中微弱的黄染nNOS阳性信号，未见明显的iNOS阳性信号；LPS组大脑皮层和海马部位iNOS被诱导表达，黄染信号可见于神经元和胶质细胞的胞浆中，nNOS阳性信号较对照组略为增强；CCK-8+LPS组胞浆iNOS、nNOS黄染信号较LPS组略为减弱；Pro+LPS组胞浆中iNOS和nNOS的阳性信号均较其他组增强。结论：1. 静脉注射LPS引起家兔MAP持续下降，成功复制了ES模型；ES时可发生脑组织损伤，可能与LPS诱导产生过量自由基以及过度表达的iNOS、nNOS催化产生大量NO有关。2. CCK-8可部分逆转LPS引起的血压下降，减轻脑损伤。3. 初步证实CCK-8可一定程度上抑制LPS诱导血液和脑组织中自由基过量生成，抑制LPS引起的血液和脑组织中NOS活性增强和iNOS、nNOS蛋白过度表达，这可能是其抗ES时组织损伤的作用机制之一。