论文部分内容阅读
目的:人参具有良好的滋补作用,但因其温燥之性使其应用受到限制,为了降低其副作用,扩大用药范围,我们用石膏、地黄、栀子等来制约或缓和人参的温燥之性,发现栀制人参的作用较好,所以本文拟从其化学成分和药理作用方面进行研究,分析探讨栀制人参的炮制原理。材料与方法:材料:药材:鲜人参购自辽宁省本溪市桓仁县药材市场,经对照2005年版中华人民共和国药典鉴定为五加科植物人参Panax ginseng C.A.Mey.的根。栀子购自安徽省亳州市药材总公司新特药公司,经对照2005年版中华人民共和国药典鉴定为茜草科植物栀子Gardenia jasminoides Ellis的干燥成熟果实。蜂蜜(河北省肃宁梦圆蜂蜜厂)。方法:1.首先通过单因素考察的方法,进行提取溶剂和齐墩果酸水解的萃取次数、加酸量、水解温度、水解时间等影响齐墩果酸水解的因素考察,确定主要影响因素。为了避免实验的繁琐先固定萃取次数为四次,然后以加酸量、水解时间、水解温度为水解的考察因素,以齐墩果酸为指标,采用正交试验优选出人参皂苷Ro水解的最佳工艺。最后采用高效液相色谱法测定栀制人参炮制前后人参皂苷Ro水解产物—齐墩果酸的含量变化。2.采用高效液相色谱法测定栀制人参炮制前后田七素的含量变化。3.以耗氧量、饮水量、肛温为指标研究栀制人参对正常小鼠能量代谢的影响。4.以牛血清蛋白作为标准品,用考马斯亮蓝法测定红细胞膜蛋白质含量,绘制蛋白质标准曲线。按试剂盒操作测定大鼠红细胞膜Na+ K+-ATP酶活力。5.采用大鼠尾动脉测量装置测定大鼠尾动脉的收缩压,研究栀制人参对正常大鼠血压的影响。结果:1.通过单因素考察,结果表明萃取次数、酸度、水解时间、水解温度对齐墩果酸的含量均产生影响。正交实验结果表明,对水解影响因素主次顺序为:A(酸度)>C(水解温度)>B(水解时间),且酸度对齐墩果酸的含量有显著性影响。经综合分析确定水解的最佳工艺为A2B3C3,即20%的盐酸,100℃,水解40 min。含量测定结果为人参生品为2.19‰,红参中降低为1.27‰,人参制品中降低为0.67‰。红参中人参皂苷Ro水解产物-齐墩果酸含量降低可能是因为在红参的加工过程中内部发生了化学反应,导致人参皂苷Ro含量降低,而其反应物不能水解出齐墩果酸所致。人参栀制品中人参皂苷Ro水解产物-齐墩果酸含量大大降低可能是由于其不仅在人参内部发生化学反应,还与栀子中的成分发生了化学反应,因此在以齐墩果酸为指标测定人参皂苷Ro的含量时人参栀制品中人参皂苷Ro的含量远远低于人参生品和红参。2.栀制人参炮制前后田七素含量测定结果为人参生品为2.06‰,红参中降低为0.88‰,人参制品降低为0.49‰。红参和人参制品中田七素的含量降低是因为田七素属二元酸类,其性质对热不稳定,特别是在加热条件下易脱水,发生裂解,进而在蒸制的过程中导致含量的降低。3.耗氧量:与对照组比较,生品组和栀制高剂量组单位时间耗氧量显著增加(生品组P<0.05,栀制高剂量组P<0.01)。栀制低剂量组虽有所增加,但是差异不显著(P>0.05)。栀蜜液组虽有所降低,但是也没有显著性差异(P>0.05)。与生品组比较,栀制高低剂量组均无显著性差异(P>0.05),栀蜜液组耗氧量显著降低(P<0.01)。4.肛温:与对照组比较,栀制高剂量组显著降低(P<0.01),其它组均无显著性差异(P>0.05)。与生品组比较,栀制高剂量组显著降低(P<0.01),其它组均无显著性差异(P>0.05)。5.饮水量:与对照组比较,生品组显著升高(P<0.01),栀蜜液组显著降低(P<0.05),栀制高低剂量组无显著性差异(P>0.05)。与生品组比较,栀制低剂量组显著降低(P<0.01),栀制高剂量组显著降低(P<0.05),栀蜜液组显著降低(P<0.01)。6.对大鼠红细胞膜Na+ K+-ATP酶活力影响的测定结果为与对照组比较,生品组Na+ K+-ATP酶活力显著升高(P<0.01),栀蜜液组显著降低(P<0.01),栀制品高、低剂量组无显著性差异(P>0.05)。与生品组比较,栀制高低剂量组,栀蜜液组均显著降低(P<0.01)。7.对正常大鼠血压的影响的测定结果为每组分别与其正常值比较,生品组在1、2周SBP明显上升(P<0.01),由血压变化图可知生品组在3、4周SBP有下降趋势。栀蜜液组SBP从第一周开始有明显降低(P<0.01),栀制低剂量组,栀制高剂量组每周SBP变化不明显(P>0.05),对照组保持稳定。结论:1.栀制人参炮制前后人参皂苷Ro的水解产物—齐墩果酸的含量大大降低,结果表明人参皂苷Ro可能是导致人上火,有温燥之性,产生副作用的成分之一。2.栀制人参炮制前后田七素的含量大大降低,结果表明田七素可能是导致人上火,有温燥之性,产生副作用的成分之一。3.栀制人参炮制前后对小鼠耗氧量、肛温、饮水量的测定结果表明,人参经栀子炮制后可以明显降低饮水量、耗氧量等基础代谢指标,提示栀子可以一定程度上制约人参的燥性。4.人参生品使Na+ K+-ATP酶活力升高、产热增加,栀子使Na+ K+-ATP酶活力降低、产热减少,而人参栀制品与生品组比较Na+ K+-ATP酶活力显著降低。说明用栀子可以降低人参增强正常大鼠红细胞膜Na+ K+-ATP酶活力的作用,进而说明栀子对人参的温燥之性有一定的缓解作用,这与“相反为制”——以寒制热的传统炮制理论相符。5.人参生品组对收缩压有双向调节作用,栀蜜液组可使血压下降,栀制高低剂量组血压无明显变化。说明以栀子为辅料对人参进行炮制,有可能缓和人参对血压的影响,使血压维持稳定,降低人参的不良反应。综上所述,本文首次研究了栀制人参炮制前后田七素和人参皂苷Ro水解产物-齐墩果酸的含量变化,首次研究了栀制人参炮制前后对能量代谢和血压的影响。根据成分变化和药效指标变化,首次提出栀制人参是以寒制热的方法,符合传统“相反为制”的制药原则。栀制人参可降低其温燥之性,其原理主要与人参皂苷Ro和田七素的降低密切相关。