目的:骨肉瘤是最常见的原发性骨恶性肿瘤之一,通常发生于儿童和年轻人。通常情况下,骨肉瘤患者的治疗后5年生存率为65-70%。然而,如果患者出现了肿瘤转移的情况,那么他们的生存率可能会更低,通常小于20%,因此迫切需要研究骨肉瘤的发病机制以期寻找新的治疗靶点,提高骨肉瘤患者预后。本研究的目的是探究FBXO28是否会调控骨肉瘤的恶性进展,以及其如何通过泛素化机制促进骨肉瘤的恶性进展,通过深入分析FBXO28与NOTCH1之间的相互作用以及其对NOTCH1的调控作用,旨在为骨肉瘤的治疗提供新的治疗靶点和药物策略,以期在临床实践中促进治疗效果的提高。方法:1、采用蛋白印迹、Real-time PCR,CCK-8、及Transwell、克隆形成,凋亡周期检测分析过表达或者敲低FBXO28对骨肉瘤细胞的影响。2、采用蛋白印迹和、免疫共沉淀去验证FBXO28和NOTCH1的相互作用,并通过构建的结构域质粒探究相互作用的结构域,通过体内泛素化实验,探究FBXO28对NOTCH1泛素化的影响。3、采用实时荧光定量PCR,探究FBXO28对NOTCH1下游靶基因的影响。结果:1、过表达FBXO28促进骨肉瘤恶性进展;2、敲低FBXO28抑制骨肉瘤恶性进展;3、FBXO28与NICD存在相互作用;4、FBXO28通过泛素化调控NICD;5、敲低NOTCH1后可以阻断FBXO28对于骨肉瘤细胞的调控作用结论:FBXO28在骨肉瘤组织中高表达,BXO28的上调促进骨肉瘤的恶性进展,而敲低FBXO28则可以抑制骨肉瘤的恶性进展。FBXO28与NICD存在相互作用,通过泛素化调控其功能。同时敲低NOTCH1后可以阻断FBXO28对于骨肉瘤细胞的调控作用,这些结果表明,FBXO28有可能成为治疗骨肉瘤的潜在靶点,具有重要的临床应用前景。