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铜是人们日常生活中常见的一种重金属，在环境中常以化合物形式存在，在水环境中则处于离子状态，为小分子非抗原物质，不能够直接刺激机体产生针对铜离子的抗体。为了检测水环境中的铜离子，本研究选用了双功能螯合剂将铜离子偶联到载体蛋白上，制备成完全抗原来刺激机体发生免疫应答而产生针对金属离子的抗体。在实验中用到的双功能螯合剂为1-(4-异硫氰苄基)乙烯基二胺-N,N,N’,N’-四乙酸(1-(4-Isothiocyanobenzyl)ethylenediamine-N,N,N’,N’-tetraacetic acid, ITCBE)，ITCBE与二价铜离子和牛血清白蛋白（BSA）偶联，制备完全抗原Cu-ITCBE-BSA，用该完全抗原免疫BALB/C小鼠；以二价铜离子与ITCBE、OVA偶联的产物Cu-ITCBE-OVA为检测原，用于间接ELISA检测方法的建立和胶体金试纸条的制备。采用非变性聚丙烯酰胺凝胶电泳法对制备的抗原进行鉴定。采用足垫快速免疫法免疫8周龄BALB/C小鼠,三免后间接ELISA方法检测小鼠血清效价；常规方法进行细胞融合并通过间接ELISA方法筛选阳性杂交瘤细胞株；有限稀释法对获得的阳性杂交瘤细胞株进行亚克隆，获得了一株能稳定分泌抗铜离子单克隆抗体的细胞株4A6。通过抗体亚类鉴定，该单克隆抗体细胞株的亚类为IgG1，亲和力常数为2.98×10~8L/mol。体内诱生法制备腹水，分别采用辛酸-硫酸铵法和亲和层析法纯化腹水；用腹水建立并优化了ELISA方法，间接竞争ELISA方法检测铜离子标准品，并建立标准曲线，抗铜单克隆抗体的标准曲线回归方程是y=-51.9x+153.02，R~2=0.9870，检测范围为：21ng/mL～488ng/mL，最低检出限为21ng/mL。采用柠檬酸三钠还原法制备了20nm的胶体金溶液，通过透射电镜等检测方法鉴定，该胶体金溶液颗粒大小均匀一致可用于胶体金探针的制备。通过条件优化，制备的胶体试纸条最低检测线为75ng/mL。稳定性测试表明，该免疫层析试纸条在4℃可稳定保存60天。