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本研究采用5个试验对肽制剂的生产制备方法以及肽对肉鸡影响的机理进行了系统的研究。 试验一 肽制剂的小试工艺研究 本试验以酪蛋白为原料,采用胰酶在体外进行了酶解温度、酶/底物比和反应时间对酪蛋白水解度影响的研究。试验为3×3×3析因设计,酶解温度分别为37℃、45℃和50℃,酶/底物比分别为1∶35、1∶30和1∶25,反应时间分别为4、5和6小时。反应过程中用10%NaOH调节酶解溶液的pH维持在8.0,以保持最大的胰酶催化活性。酶解终点时升高溶液温度使胰酶灭活,随后分别测定溶液中氨基氮量,计算酪蛋白的水解度。试验结果表明,酪蛋白的酶解受酶解温度,酶/底物比和反应时间影响显著,酪蛋白水解度随酶解温度、酶/底物比和反应时间增加而增加。肽的适宜生产条件是酶解温度为50℃,酶/底物比为1∶30,反应时间为6小时。 试验二 肽制剂生产中试工艺及质量检测方法的建立 在酶解温度为50℃、酶/底物比1∶30,反应时间为6h的条件下,进行工厂化肽制剂生产工艺研究。并建立一套肽制剂质量检测方法,对生产的肽制剂进行成分分析和质量检验,测定内容包括平均肽链长度,肽制剂中游离氨基酸比例,采用滤过分子量为1000Da的中空纤维超滤器对肽制剂进行分离,计算分子量在1000Da以下和以上的寡肽和大肽所占比例。试验结果表明,利用包括酪蛋白溶液配制,酶解反应,过滤,脱盐处理,浓缩和喷雾干燥等处理过程和技术参数等生产工艺,可以生产肽制剂。利用以上工艺过程生产的肽制剂中水分占5.634%。以肽制剂的干样为基础,其中游离氨基酸占5.320%,分子量小于1000Da的寡肽占90.590%,分子量大于1000Da的大肽占4.090%。用本工艺生产出的肽制剂满足各种指标要求,肽制剂可以用于肽营养理论试验研究或生产实践。 试验三 肉仔鸡对肽的吸收率研究 100只体重相近的三周龄商品代爱维因公肉仔鸡,随机分为4处理组,每处理5个重复,每重复5只鸡。其目的是同氨基酸和酪蛋白对比,进行肉仔鸡对肽的吸收率研究。将试验鸡先绝食32小时,然后分别采食由氨基酸、肽、酪蛋白为蛋白原料配制的纯合日粮以及无氮日粮。四种日粮均添加0.5%的三氧化二铬作为外源指示剂,试验结束后,用戊巴比 妥钠麻醉试鸡,按重复为单位收集回肠 中文摘要端食糜,分别测定食糜中蛋白、氨基酸和铬含量,计算三种饲粮的总蛋白和各氨基酸吸收率。结果表明:1.肉鸡对氨基酸组日粮总蛋白吸收率极显著高于肽组和酪蛋白纠。1‘<0门),比肽组和酪蛋白组蛋白吸收率分别高5.10%和5.27%。2.肽组和酣沃 ’伯厂1粮中多数氨基酸(如天冬氨酸、苏氨酸、丝氨酸。谷氨酸、甘氦酸、丙勤酸、缄氨酸、蛋氨酸、异亮氨酸、酪氨酸、赖氨酸、组氨酸、脯氨酸和色氨酸)的吸收率均显著(R0.05 )或极显著(P<0.01)低于氨基酸组日粮相应氨基酸的吸收率。而亮氨酸、苯丙氨酸、眺氨酸的吸收率,肽组、酪蛋白组和氨基酸纠问无显著差异(P>O.0引。表明肽组和酪蛋白组日粮总蛋白吸收率的降低是多数动丛沙引吸收率共同降低的结果。3.尽管肽组和酪蛋白组日粮中各种氨基酸(精氮焕除外)的吸收率平均值均低于氨基酸组日粮的平均值,但日粮中各种氨基酸吸收纠8低的百分率有明显不同。相对而言,天门冬氨酸、苏氨酸、丝氨酸、谷氨酸、甘氨酸、缅氨酸、脯氨酸、异亮氨酸和耽氨酸等的差异幅度较大,而组氨酸、赖氨酸、蛋氨酸、精氨酸、苯丙氨酸、亮氨酸和酪氨酸的差异幅度较小。4.肌纠 H粮同酪蛋白组日粮总蛋白吸收率间没有显著差异(P>0.05)。但肽组R粮中丝氮酸,缀氨酸,蛋氨酸,异亮氨酸,赖氨酸,精氨酸吸收率显著计州.05)或极显著(1‘<0.OI)大于酪蛋白组日粮中相应氨基酸吸收率。酪蛋白组日粮中仅有色氨酸吸收率极显著大于肽组日粮吸收率uu.01)。试验四 纯合日粮条件下肚对肉鸡生产性能的影响及其机理研究 IR龄商品代爱维因公肉仔鸡 150只,随机分为 3个处理组,每处理组 5个重复,每重复10只。分别饲喂由氨基酸、肽和酪蛋白为蛋白原料配制模式相同的纯合厂讨巳 试期为ZI 天,试验结束后,计算平均日增重、采食量和料肉比,心脏采血分离血清测定相关生理指标。每重复另取2只鸡测定鸡体干物质、蛋白、脂肪和能量含量,同时计算3组肉鸡的日粮氮沉积率和能量沉积率。 结果表明:1.肽和酪蛋白均极显著提高了肉鸡的采食量和日增重(P<0刀1)。这可能与_二者能以肽形式被完整吸收有关。2.肽和酪蛋白显著提高了肉鸡体内干物质含量。P<0.of),但干物质中氮含量显著降低(P<0.05或 P<0.of),脂肪含量极显著提高 小J.01)。这可能与二者以肽形式吸收可以节省机体能量消耗,而促使脂B厂沉积增加有关。3.肽和酪蛋白影响肉鸡生长檄素和L的分泌,提高日粕氮沉积率和能量沉积率(P<0刀1)。4.肽与酪蛋白在对肉鸡生长性能,机体组成以及斗邢生化指标的影响存在一定差异。这可能与二者在消化道中完整肽吸收B加〕比例和肽链长度不同有关。试验五 实用