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研究目的骨骼肌损伤后具有再生修复的能力。骨骼肌损伤修复过程中伴随着复杂的生物学调节机制,肌卫星细胞是骨骼肌再生修复过程中重要的修复细胞。肌卫星细胞的增殖和分化受到多种生长因子的调节,TGF-β1被认为是影响卫星细胞的负性调节因子,对卫星细胞的增殖和分化有重要作用。本研究拟通过建立运动性骨骼肌损伤实验动物模型,从组织学水平观察肌纤维形态结构的变化,同时观察TGF-β1基因在骨骼肌损伤修复过程中的变化,研究运动性骨骼肌损伤修复过程中不同时刻腓肠肌内TGF-β1的变化特征。研究方法72只8周龄健康雄性SD大鼠,经过跑台适应训练后根据体重随机分成9组:对照组(C组)、运动损伤后即刻组(0h组)、6h组、12h组、24h组、48h组、72h组、1w组、2w组。每组大鼠数量均为8只。实验阶段,除对照组外其余各实验组大鼠均采用动物跑台进行持续性下坡跑运动,跑台坡度为-16°,速度为16m/min,持续运动90min。分别在运动后0h、6h、12h、24h、48h、72h、1w、2w后处死动物,进行以下实验:(1)组织学分析:取右下肢腓肠肌,多聚甲醛固定后,HE染色观察骨骼肌形态结构的变化;(2)mRNA分析:取左下肢腓肠肌,低温保存,抽提总RNA后采用实时荧光定量PCR(Real Time PCR)检测TGF-β1mRNA表达的变化;(3)免疫组织化学分析:取右下肢腓肠肌,多聚甲醛固定后,采用免疫组织化学技术检测TGF-β1蛋白表达量的变化。研究结果(1)组织学分析:C组肌纤维排列整齐、规则;0h组未发现明显的形态学改变;6h组肌纤维肿胀明显;12h组肌纤维持续肿胀,并出现部分坏死溶解现象;24h组肌纤维部分断裂,有少量炎症细胞浸润;48h组炎症细胞明显增多;72h组大量炎症细胞浸润;1w组偶见炎症细胞浸润,肌纤维无明显肿胀;2w组肌纤维形态结构基本恢复正常。(2)mRNA分析:与C组比较,0h组TGF-β1mRNA表达略升高(P>0.05),6h组、24h组和48h组TGF-β1mRNA表达降低(P>0.05),12h组、72h组、1w组和2w组TGF-β1mRNA表达明显降低(P<0.05)。(3)免疫组织化学分析:与C组相比,12h组、48h组和1w组TGF-β1蛋白表达量降低(P>0.05夕,0h组、6h组、72h组和2w组TGF-β1蛋白表达量明显降低(P<0.05)。研究结论1.一次下坡跑运动能够明显引起运动性骨骼肌损伤,骨骼肌损伤发生2周后基本恢复正常,且未见纤维化形成。2.一次下坡跑后,骨骼肌损伤修复过程中TGF-β1的表达整体呈下降趋势,无论是在转录水平,还是在翻译水平都降低。