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研究背景长期以来,Nrf2作为重要的抗氧化转录因子而受到广泛关注,随着研究深入,发现同一家族的Nrf1分子所发挥的抗氧化功能也不容忽视。Nrf1是重要的跨膜转录因子,以特定方式锚定于内质网上,当需要时会经一系列复杂的翻转、修饰和加工过程从内质网逆转位释放到细胞浆,再进入细胞核调控下游基因的表达。有研究发现,全基因组敲除Nrf1后小鼠胚胎在13.5天时因严重氧化应激而死亡;而敲除Nrf2后则无明显表型,但小鼠胚胎对氧化刺激的敏感性升高;在Nrf1和Nrf2双敲后,小鼠胚胎在约9.5天时死亡。提示Nrf1与Nrf2在功能上有重叠也有区别。另有研究发现,Nrf1与Nrf2均可通过抗氧化元件（ARE）来调控靶基因表达,但两者对相关基因的调控存在差异,其具体机制仍未阐明。因此,通过研究Nrf1和Nrf2对抗氧化解毒基因的差异性调控,可帮助理解两者在功能上的异同。研究方法与结果（1）利用qRT-PCR与Western Blot技术,测定tBHQ（50uM）或DTT（1mM）刺激四种细胞系(HepG2,及基于HepG2构建的Nrf1?-/-、Nrf2-/-、caNrf2（35）N细胞)后抗氧化相关基因转录表达的mRNA及蛋白水平,结果表明:a.tBHQ与DTT均可诱导Nrf1及Nrf2的表达,诱导表达的效果有一定的时间依赖性;且DTT刺激因引发内质网应激而一定程度上影响了Nrf1的活化;b.Nrf1与Nrf2之间存在调控关系,推测Nrf2是Nrf1的上游调控者;Nrf1与Nrf2对抗氧化相关基因均有调控作用,其中HO-1,NQO1,GSR,Gpx1等基因与Nrf2的关系较为密切,GCLM,GCLC与Nrf1的关系较为密切;MT1E基因可能主要受Nrf2的负调控;c.正常生理状态下主要由Nrf1发挥抗氧化功能,而应激情况下主要由Nrf2发挥抗氧化功能;（2）通过构建质粒,利用双荧光素酶报告基因实验,结果显示:Nrf1与MT1E-6×ARE1-Luc表达质粒特异性相互作用,Nrf2与MT1E-6×ARE2-Luc表达质粒特异性相互作用,且后者作用强于前者。提示MT1E基因主要受到Nrf2的负调控。（3）通过构建质粒,利用活细胞成像技术及双荧光素酶报告基因技术,得出:AD1结构域可促进N298融合蛋白从内质网腔翻转到细胞质中;Nrf1缺失N端2-156位氨基酸后活性下降。研究结论（1）tBHQ与DTT均可诱导Nrf1及Nrf2的表达,且DTT可能抑制Nrf1的活化过程;（2）Nrf1与Nrf2差异性调控抗氧化基因,MT1E基因主要受到Nrf2的负调控作用;应激状态下主要由Nrf2发挥抗氧化功能;（3）MT1E-6×ARE1-Luc表达质粒与MT1E-6×ARE2-Luc表达质粒可分别作为研究Nrf1及Nrf2的特异性工具。