中性粒细胞在宿主抗感染免疫中发挥着重要作用。当局部组织发生感染时，中性粒细胞渗出血管，到达感染部位，吞噬并杀死入侵的病原微生物，同时引起组织损伤和炎症反应。临床证据和试验结果均提示，中性粒细胞数量的增加与肿瘤预后密切相关，中性粒细胞在肿瘤中的作用也引起了越来越多的关注。在肿瘤微环境中存在着N1型(抑瘤)和N2型(促瘤)两种肿瘤相关中性粒细胞。这两种肿瘤相关中性粒细胞在调控诱导、表型功能等方面存在明显差异。N1型肿瘤相关中性粒细胞与抗感染免疫中的中性粒细胞在表型和功能上都很相似。这种表型的中性粒细胞，其与免疫激活相关的细胞因子及趋化因子表达增加，而与免疫抑制相关的分子如精氨酸酶则表达降低，因此，也就具有了更强的肿瘤杀伤作用。N2型肿瘤相关中性粒细胞则通过分泌血管生成因子和基质降解酶类来抑制机体的抗肿瘤免疫反应，进而发挥促进肿瘤生长的效应。胃癌是全球发生率第四、死亡率第二的恶性肿瘤，预后很差。肿瘤微环境中浸润的免疫细胞的类型、数量以及浸润部位与多种肿瘤，包括胃癌的预后密切相关，而在多种肿瘤中均发现了中性粒细胞的浸润，肿瘤相关中性粒细胞的作用也慢慢得到了越来越多的重视。目前对中性粒细胞与胃癌的研究主要集中在中性粒细胞与胃癌预后的关系上，而对中性粒细胞在胃癌中的调控、作用及作用机制研究甚少。目的：1.分析胃癌患者外周血中及不同类型胃组织中的中性粒细胞的分布情况。2.研究胃癌微环境对中性粒细胞的调控。3.初步探讨胃癌组织培养上清诱导的条件性中性粒细胞的免疫抑制功能。方法：1.胃癌患者与健康成人外周血中性粒细胞频率检测及分析收集胃癌患者和健康成人外周血，分别用抗人CD45和抗人CD66b流式抗体进行染色，用流式细胞仪进行检测。分析每个个体外周血CD45+CD66b+的中性粒细胞占CD45+白细胞的比例，并对所有的结果进行统计学分析。2.胃癌患者不同类型胃组织中中性粒细胞的频率检测及分析收集胃癌患者的不同类型胃组织标本制成单细胞悬液，分析每个个体不同类型胃组织(胃癌、癌旁及正常胃组织)中CD45+CD66b+的中性粒细胞占CD45+白细胞的比例，并对所有的结果进行统计学分析。3.胃癌患者不同类型胃组织中中性粒细胞的原位检测及分析将胃癌组织、癌旁组织和正常胃组织标本制成石蜡切片，用鼠抗人CD15抗体对石蜡切片中的中性粒细胞进行免疫组织化学染色，光学显微镜下观察着色情况。4.胃癌患者与健康成人外周血中性粒细胞表面趋化因子受体分析收集胃癌患者和健康成人外周血，分别用抗人CD45、抗人CD66b、抗人CXCR2及抗人CXCR4流式抗体进行染色，用流式细胞仪进行检测，分析其表面趋化因子受体的表达。5.胃癌患者不同类型胃组织浸润的中性粒细胞表面趋化因子受体分析收集胃癌患者不同类型胃组织标本制成单细胞悬液，流式检测中性粒细胞表面趋化因子受体CXCR2及CXCR4的表达情况。6.胃癌组织培养上清和正常胃组织培养上清诱导的条件性中性粒细胞的寿命检测分别用30%胃癌组织培养上清(30%TCS)、30%正常胃组织培养上清(30%NTCS)及完全1640培养基刺激健康成人外周血中性粒细胞12h后，用7-氨基放线菌素(7-AAD)检测诱导的条件性中性粒细胞的生存情况。7.胃癌组织培养上清和正常胃组织培养上清诱导的条件性中性粒细胞免疫抑制功能研究分别用30%胃癌组织培养上清(30%TCS)和30%正常胃组织培养上清(30%NTCS)刺激健康成人外周血中性粒细胞12h后，得到的条件性中性粒细胞与从正常人外周血中磁珠分选得到的CD3+T细胞共培养5d后，收集细胞检测T细胞增殖能力。结果：1.收集53例胃癌患者外周血和50例健康成人外周血，流式检测CD45+CD66b+中性粒细胞占CD45+白细胞的比例，统计学分析结果显示胃癌患者外周血中性粒细胞比例明显高于健康成人(78.72%±1.19%vs66.09%±1.17%, P<0.0001)。2.收集53例胃癌患者不同类型胃组织（胃癌、癌旁及正常胃组织）标本，流式检测胃组织标本中CD45+CD66b+中性粒细胞占CD45+白细胞的比例，发现胃癌组织中的中性粒细胞的频率显著高于癌旁组织(6.81%±0.85%vs4.09%±0.62%, P<0.01)和正常胃组织(6.81%±0.85%vs3.84%±0.35%, P<0.01)。3.将胃癌患者不同类型胃组织（胃癌、癌旁及正常胃组织）标本制成石蜡切片，进行免疫组化染色，结果显示中性粒细胞在胃癌组织中浸润增加。4.收集24例胃癌患者外周血和15例健康成人外周血，流式检测中性粒细胞表面趋化因子受体CXCR2和CXCR4的表达，统计学分析显示，胃癌患者外周血中的中性粒细胞表面趋化因子受体CXCR2的表达低于健康成人(49.32%±4.27%vs97.80%±0.97%，P<0.01），而CXCR4的表达高于健康成人外周血(30.53%±3.20%vs9.91%±1.35%, P<0.05)。5.收集24例胃癌患者不同类型胃组织(胃癌、癌旁及正常胃组织)标本，流式检测不同类型胃组织标本中浸润的中性粒细胞表面趋化因子受体CXCR2和CXCR4的表达，结果显示胃组织中浸润的中性粒细胞主要表达趋化因子受体CXCR4，并且胃癌组织浸润的中性粒细胞表达CXCR4的比例有高于癌旁(24.32%±5.84%vs21.77%±7.45%, p>0.05)及正常胃组织(24.32%±5.84%vs21.86%±7.08%, p>0.05)的趋势(无统计学差异)。6.分别用胃癌组织培养上清、正常胃组织培养上清和完全1640培养基刺激健康成人外周血中性粒细胞后，用7-AAD检测中性粒细胞的存活情况，结果发现：胃癌组织培养上清刺激后的中性粒细胞中7-AAD+的死细胞比例低于正常胃组织培养上刺激后的死细胞比例(18.85%±2.35%vs32.45%±1.85%, p<0.05)；而正常胃组织培养上清全刺激后中性粒细胞中的死细胞比例又低于完全1640刺激后的死细胞比例(32.45%±1.85%vs74.3%±2.20%, p<0.01)。7.分别用胃癌组织培养上清和正常胃组织培养上清刺激健康成人外周血中性粒细胞后，与健康成人外周血CD3+T细胞共培养，检测CD3+T细胞的增殖情况，发现相较于正常胃组织培养上清，胃癌组织培养上清刺激后的中性粒细胞抑制了CD3+T细胞的增殖(9.10%±1.24%vs5.99%±1.01%, P<0.01)。结论：1.中性粒细胞在胃癌患者外周血中比例增高，并在胃癌组织中浸润增加。2.胃癌患者外周血中性粒细胞表面趋化因子受体CXCR2表达下调，CXCR4表达上调；胃癌微环境中的中性粒细胞主要表达趋化因子受体CXCR4。3.胃癌组织培养上清诱导的条件性中性粒细胞的寿命延长。4.胃癌组织培养上清诱导的条件性中性粒细胞能抑制CD3+T细胞增殖。