目的:通过建立大鼠急性肾衰竭模型,探讨手术再造结肠袋内填充固定化脲酶对血尿素氮的吸附作用及其对血尿素氮的影响。方法:以明胶为载体材料,应用包埋—交联的固定化方法,以戊二醛作为交联剂,制备了戊二醛交联明胶固定化酶。将大鼠完全随机分为六组,正常对照组(A组,共3只)、假手术组(B组,共7只)、单纯结肠造袋组(C组,共7只)、单纯肾衰组(D组,共8只)、肾衰结肠造袋组(E组,共8只)、肾衰结肠造袋填充脲酶组(F组,共8只)。术前连续两天灌肠,腹腔注射戊巴比妥钠,麻醉满意后,假手术组仅打开腹腔后缝合,不进行特殊处理。单纯结肠造袋组打开腹腔,在右半结肠距回盲部3cm左右处,选一段长约1.5cm血供丰富的肠管,游离此肠管并保护好肠系膜血管,将离断肠管两端荷包缝合。右半结肠两个断端行间断黏膜外单层吻合后关闭腹腔。肾衰结肠造袋组手术方法同单纯结肠造袋组。肾衰结肠造袋填充脲酶组打开腹腔后,用上述相同的方法离断肠管,游离肠管一端行荷包缝合,由另一个断端置入固定化脲酶至肠管后,将断端荷包缝合。右半结肠的两个断端行间断黏膜外单层吻合后关闭腹腔。所有手术大鼠均按10万UI肌肉注射青霉素防止感染,正常对照组和单纯肾衰组注射同等剂量的生理盐水。术后三天内大鼠禁食,饮水为葡萄糖粉配制的10%葡萄糖水。三天后给予流质饮食。术后每天按时对手术切口进行消毒两次,持续一周。术后第五天各组大鼠禁水12小时,分别在D、E、F组大鼠两侧后肢肌肉注射50%甘油(10mL/kg),A、B、C组大鼠注射同样剂量的生理盐水后,实验动物自由进食和饮水。所有大鼠均在注射甘油后分别在24h、48h和72h行乙醚麻醉,用毛细管于内眦采血各1mL检测尿素氮的含量。处死大鼠后,提取造袋结肠及内容物,用盐酸滴定法测氨的含量,并提取肾脏标本和填充固定化脲酶肠管的标本,用中性福尔马林固定,HE染色,观察肾脏组织和肠管的形态变化。结果:单纯肾衰组中,血尿素氮的含量在24 h较正常对照组、假手术组及单纯结肠造袋组明显升高(P<0.05),有显著性差异;48 h后血尿素氮的含量呈持续增高趋势,至72 h时达到最高值,其含量均高于正常对照组、假手术组及单纯结肠造袋组,组间比较有显著性差异(P48h=0.004,P72h=0.007)。说明血尿素氮在注射甘油后24 h内开始升高,并在72 h内持续升高。肾衰结肠造袋组中,血尿素氮的升高趋势也与单纯肾衰组一致,较正常对照组、假手术组及单纯结肠造袋组升高,有显著性差异(P24h=0.002,P48h=0.003,P72h=0.003)。肾衰结肠造袋填充脲酶组,血尿素氮的含量在24 h较正常对照组、假手术组相比升高,但无显著性的差异;与肾衰结肠造袋组相比明显降低,组间有着显著性的差异(P24h=0.006);48h后血尿素氮的含量明显低于正常对照组、假手术组及单纯结肠造袋组(P48h<0.05),与肾衰结肠造袋组相比明显降低,有显著性的差异(P48h=0.000);至72h时血尿素氮含量有所上升,但低于正常对照组,组间比较均有显著性差异(P72h=0.03),此时血尿素氮的含量仍然明显低于肾衰结肠造袋组,有显著性差异(P72h=0.01)。说明肾衰结肠造袋填充脲酶血尿素氮含量在24 h内已经开始降低,在48 h内降低最为明显,在48 h后由于脲酶的浓度降低,血尿素氮的含量逐渐上升,在72 h时升至最高,但仍低于正常对照组。肠管填充物中不同程度的含有氨或铵离子,并对造袋结肠无明显刺激。结论:1、固定化脲酶对急性肾衰竭大鼠的血尿素氮具有良好的吸附作用。2、固定化脲酶置入再造结肠袋囊腔72h内,对大鼠肠管无明显刺激作用。3、固定化脲酶在大鼠再造结肠袋内稳定,可以直接吸附尿素氮。