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目的:建立金银花及金芪降糖片中绿原酸含量测定的方法。优选金银花酶辅助提取法及半仿生提取法的工艺条件。筛选金银花提取物的纯化方法。金银花提取物对a-淀粉酶的影响进行研究,以初步考察其药理作用。方法:运用反相色谱法(RP-HPLC)测定金银花药材与金芪降糖片中绿原酸的含量。以绿原酸得率为指标考察了乙醇回流法、水浸提取等方法对金银花中绿原酸提取率的影响,确定适宜的提取方法。通过对酶用量、酶解时间、酶解时pH和酶解温度四个因素对纤维素酶、果胶酶辅助提取金银花中绿原酸进行单因素考察,并在此基础上完成L9(34)正交试验设计,筛选最佳酶辅助提取条件,并筛选了纤维素酶和果胶酶复合酶提取的条件。另外,通过对提取液pH值、溶剂用量、提取温度与时间四个因素考察了半仿生提取金银花中绿原酸的条件,并通过正交试验设计筛选半仿生提取的最佳工艺方法。对金银花提取物进行纯化,以浸膏得率和绿原酸转移率为指标比较醇沉纯化法和乙酸乙酯纯化的优劣。对纯化后的金银花提取物进行药理作用初探,通过测定金银花提取物对α-淀粉酶的影响初步考察其药理作用。结果:确定色谱条件为色谱柱:DIKMA Diamondsil C18柱(4.6mm×250mm,5μm);流动相:乙腈—0.4%磷酸溶液(13:87);流速:1mL.min-1;检测波长:327nm;柱温:35℃,AUFS:2.000,进样量为10μL。确定以水温浸法作为基本提取方法,条件为70℃浸泡提取药材2次,第一次15倍量药材重量的溶剂提取1h,第二次10倍量溶剂提取1h。纤维素酶辅助提取绿原酸正交试验的最佳提取工艺条件:纤维素酶用量药材重量的为0.5%,酶解时pH6.0,40℃条件下酶解1.5h,绿原酸得率2.38%,比未酶解得率提高21.99%。果胶酶最佳提取工艺条件是酶用量为药材重量的1.0%,酶解时pH4.0,50℃条件下酶解1.5h,绿原酸得率2.25%,比未酶解得率提高20.58%。复合酶处理提取金银花中绿原酸的最佳条件为:纤维素酶-果胶酶(1:1)的加入量为药材量的0.2%,溶于10倍量药材重量的pH5.5柠檬酸缓冲液中,45℃条件下酶解1.5h,再加水70℃温浸两次,每次1h,加水量分别为药材重量的15倍、10倍,绿原酸得率较高,为2.46%,比未酶解得率提高24.87%。半仿生提取绿原酸的最佳条件为用硫酸及氢氧化钠调节提取液的pH至2.2、7.4,提取液加入量为药材重的20倍,70℃条件下浸取2次,每次2h,绿原酸得率为2.14%。金银花中绿原酸的最佳纯化方法是60℃条件下将提取液减压浓缩至相对密度1.10~1.20,浓缩液中加入3倍量的乙醇使含醇量达到75%,静置12h,过滤,滤液经减压浓缩、真空干燥后粉碎。药理实验结果表明绿原酸在体外对α-淀粉酶活性具有抑制作用。当绿原酸与酶的总浓度比为2.5:1时,绿原酸对α-淀粉酶的抑制率为96.22%。结论:所选反相色谱法专属性强,峰形好,分离度高,为金银花中绿原酸含量测定的优选条件,同时作为金芪降糖片中绿原酸的含量测定方法。实验表明金银花用纤维素酶和果胶酶处理均能显著提高绿原酸得率,综合两种酶的最佳提取工艺,将纤维素酶与果胶酶的联合应用,金银花中绿原酸的提取率增加的同时还可以减少酶的用量,这对减低生产成本和该工艺的推广均具有一定的参考意义。在原有半仿生法基础上进行改良,将三次提取改为两次提取,有效的缩短了提取时间,并将提取液由缓冲液改为酸(碱)调解,降低了生产成本,但绿原酸得率(2.14%)较原有半仿生法(2.15%)并无太大改变。确定了经济、高效、实用的提取精致工艺。醇沉法对绿原酸进行纯化,其方法合理,经济实用,生产操作性强。金银花中提取的绿原酸具有对α-淀粉酶的抑制作用,其降糖机制可能与其抑制α-淀粉酶活性,从而延缓碳水化合物在小肠的吸收有关,此结果为进一步药理研究提供了一定的理论依据。