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第一部分:构建精囊炎大鼠模型探讨精囊炎相关病理机制目的:构建一种新颖的精囊炎大鼠模型为研究该疾病的发病机制提供一种有效的研究模型。方法:将8只雄性大鼠一侧精囊根部行缝线不全结扎手术,另一侧不结扎作为自身对照。在术后第8天收取精囊组织样本。使用苏木精-伊红染色和马松三染色分别观察精囊组织病理生理形态和纤维化程度。应用免疫印迹和免疫组织化学方法检测精囊组织肿瘤坏死因子α和环氧化酶2水平。使用实时荧光定量PCR法检测前炎性细胞活素基因表达水平。使用相关检测试剂盒检测收集的精囊液中H2O2水平。结果:苏木精伊红染色提示精囊根部缝线部分结扎的精囊组织内有大量炎性细胞浸润,组织形态不清晰。肿瘤坏死因子α和环氧化酶2蛋白在处理过的精囊组织内表达显著上升(P<0.0001)。肿瘤坏死因子α,环氧化酶2,白介素6和诱导型一氧化氮合酶mRNA表达水平在处理过的精囊组织中显著升高(P<0.05)。与自身未经根部结扎处理的另一侧精囊中精囊液体比较,部分结扎侧精囊中的精囊液H2O2水平显著升高(P<0.05)。结论:大鼠精囊根部缝线部分结扎是一种构建大鼠精囊炎模型的有效方法,精囊炎与精浆H2O2水平增高有关。第二部分:比较正常健康男性与精囊炎病人精子质量相关参数及精浆炎症因子水平目的:研究精囊炎与精子质量参数及精浆炎症介质水平的关系。方法:前瞻性收集了18例伴有血精经MRI确诊精囊炎且经尿道精囊镜检查的患者和18例精子质量参数正常的健康志愿者的精液样本。采用经尿道精囊镜从伴有持续性血精精囊炎患者的精囊液中采集精液标本。对照组精子样本通过健康志愿者手淫方式收集。精子质量使用WLJY-9000彩色精液分析系统分析。精浆样本中的肿瘤坏死因子α(TNF-α)和白介素-6(IL-6)表达水平使用ELISA法检测。采用特定试剂盒检测精浆中的H2O2水平。结果:与正常健康人精液相比,精囊炎患者的精液样本中精子质量明显偏低。与对照组的11.07%相比,在精囊炎组其前向+非前向运动精子比率均值为71.54%,二者具有明显的统计学差异(P<0.002)。与对照组相比,精囊炎组精浆中TNF-α,IL-6(P<0.001)和H2O2水平(P<0.05)显著升高。结论:精囊炎与精浆炎症因子和H2O2高水平及精子质量降低有着密切关系。第三部分:抗氧化Nrf2与精囊炎相关低精子质量关系研究目的:研究精囊炎与精子质量关系,及相关的抗氧化分子机制。方法:前瞻性收集了18例经尿道精囊镜检查的精囊炎患者和18例精子质量参数正常的健康志愿者精子样本。对于精囊炎组,在经尿道精囊镜检术中,从精囊炎病人的精囊液中采集精液标本。对于对照组精子样本,则通过健康志愿者手淫方式收集。用非连续性Percoll细胞分离液梯度离心法纯化精囊炎组和对照组精液中的精子。使用PCR法检测分离精子沉淀的PRM2,TLR2和TLR4的m RNA表达。用细胞浆裂解液和细胞核裂解液分别裂解精子蛋白,做核蛋白H3和GAPDH蛋白检测。流式细胞仪检测精子细胞内的ROS水平。使用免疫荧光和western blot法检测精子Nrf2蛋白表达水平。结果:经过检测发现,与正常健康人精液中精子相比,精囊炎患者的精液中精子ROS水平和Nrf2表达水平明显升高,差异具有统计学意义(P<0.05)。Nrf2在精子细胞胞浆和胞核均有表达。结论:抗氧化Nrf2与精囊炎患者的精子质量有密切关系。