目的：利用基因工程的技术手段，获得融合表达的鼠疫菌特异性抗原，建立一种非F1抗原的新型鼠疫快速诊断方法，并与经典的鼠疫菌检测方法相结合用于解决鼠疫监测现场工作中遇到的各种问题。 方法：选取了四个鼠疫菌的特异基因(YP01089、pst、ymt、hmsH)，根据已发表的鼠疫菌C092株全基因组序列设计引物，PCR扩增目的基因片段。实验中采用pET-30a(+)作为表达载体，通过双酶切反应和连接反应，将目的基因片段定向插入到载体中，构建重组表达质粒。IPTG诱导，使重组质粒在其宿主菌E.coli BL21(DE3)中稳定高效地表达带有组氨酸标签的融合蛋白。Western-blot法鉴定各融合蛋白的免疫反应性。应用固定化金属离子亲和层析技术(Ni-NTA柱)纯化重组蛋白，并初步建立了基于该重组蛋白的间接ELISA方法。 结果：实验获得了五种融合表达蛋白-重组YP01089、重组Pst、重组Ymt、重组的去掉信号肽的HmsH、重组的完整HmsH，除重组Pst以可溶形式存在外，其他四种均形成了包涵体。且Western-blot结果显示重组Pst可与鼠疫诊断血清和确诊病人血清发生特异性反应。用纯化的重组Pst建立的间接ELISA方法，对86份现场监测标本及4份浙江省F1抗体高滴度者的血清标本进行检测，结果显示该方法可以将人和动物的阳性与阴性标本明显地区别开来，且经统计学检验证明存在于浙江F1抗体高滴度者血清中的抗鼠疫菌素抗体的相对含量与健康人无显著差别。 结论：基于重组Pst的间接ELISA方法具有较好的敏感性和特异性，且为“浙江省若干人血清中检测出高滴度的鼠疫F1航体”问题的解决提供了新的线索。本研究为充实鼠疫菌快速检测技术，发展适于基层实验室应用的诊断试剂奠定了坚实的基础。