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ARC综合症（arthrogryposis-renal dysfunction-cholestasis,ARC）是一种常染色体隐性遗传性疾病，表现为关节挛缩、肾功能衰竭、胆汁淤滞以及血小板α-颗粒内容物的缺失，研究表明Vps33b基因突变是导致这个疾病发生的分子机制之一，因此我们推测Vps33b蛋白可能参与了α-颗粒的形成。 在本研究中，我们选用HEK293T和Meg01细胞系作为体外研究工具，利用蛋白质谱和免疫共沉淀的方法，确定了VIPAR、Sec22b和α-tubulin与Vps33b蛋白存在相互作用，并通过构建表达Vps33b不同截短体蛋白结合免疫沉淀实验发现，Vps16b与全长的Vps33b蛋白结合，而α-tubulin和Sec22b则分别与Vps33b中的两个Sec-1片段结合。荧光共聚焦显微镜结果显示，在分化的Meg01细胞生成前血小板的向外延伸的神经突触样细丝中，Vps33b复合物呈现出细丝状的分布，并且vWF阳性囊泡与Vps33b复合物存在明显的共定位现象，提示Vps33b参与了血小板α-颗粒的运输。 为了在体观察Vps33b蛋白敲除对血小板功能的影响，我们分别构建了全身性Vps33b基因敲除小鼠、巨核系/血小板特异性Vps33b基因敲除小鼠以及他莫昔芬诱导的造血干细胞Vps33b基因敲除三种小鼠模型，结果发现Vps33b基因纯合缺失的小鼠存在胚胎早期致死性，造成纯合子小鼠不能获得，对杂合子小鼠的血小板功能进行检测发现未受到明显影响；在对巨核系/血小板特异性Vps33b基因敲除小鼠的血小板进行检测时，发现Vps33b蛋白仅有部分被敲除，血小板α-颗粒的形成以及血小板相关功能仍未受到影响；但当我们对造血干细胞Vps33b基因敲除的小鼠血小板进行检测时发现Vps33b蛋白被完全敲除，并表现为血小板α-颗粒的缺失和相关聚集功能受到影响，从而阐明Vps33b蛋白确实参与了α-颗粒的形成，且有少量的Vps33b蛋白存在即可，并且发现了Vps33b蛋白的产生阶段早于巨核细胞的发生。 为了进一步证实Vps33b复合物参与血小板α-颗粒的形成，我们通过分离胎肝诱导分化原代巨核细胞，分别观察Vps33bfl/fl-Scl-Cre-和Vps33bfl/fl-Scl-Cre+小鼠巨核细胞不同分化阶段的vWF阳性囊泡（作为α-颗粒的指示标记）和α-tubulin的定位情况，发现Vps33b蛋白敲除的巨核细胞在分化阶段存在vWF阳性囊泡向远端运输障碍，vWF阳性囊泡均滞留在巨核细胞胞浆内，从而揭示Vps33b蛋白可能是通过与α-tubulin的结合参与血小板α-颗粒在胞内的运输，故而当Vps33b蛋白缺失时，血小板α-颗粒内容物运输障碍，导致血小板α-颗粒内容物的缺失。