【摘 要】
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目的研究“核HO-1”是否降低缺氧损伤后的体外血脊髓屏障的通透性。方法培养人脑微血管内皮细胞(HCMEC/D3)和人脊髓星型胶质细胞(HA-sc),并将HO-1C?23质粒和空载质粒分别转染
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目的研究“核HO-1”是否降低缺氧损伤后的体外血脊髓屏障的通透性。方法培养人脑微血管内皮细胞(HCMEC/D3)和人脊髓星型胶质细胞(HA-sc),并将HO-1C?23质粒和空载质粒分别转染到HCMEC/D3中,转染HO-1C?23三天后,提取转染HO-1C?23和空白对照HCMEC/D3细胞核和细胞浆蛋白,western检测细胞核和细胞浆中血红素氧合酶1(Heme Oxygenase 1,HO-1)蛋白表达量,HCMEC/D3细胞与HA-sc细胞利用Transwell小室构建体外血脊髓屏障,分为HO-1C?23组、空载组、空白对照组,分别给予终浓度为150μM氯化钴缺氧诱导24h处理,western技术检测微囊蛋白1(caveolin-1,CAV-1)、微囊蛋白2(caveolin-2,CAV-2)、ZO-1、occludin蛋白表达,免疫荧光技术检测CAV-1、CAV-2、ZO-1、occludin分布情况,HRP检测血脊髓屏障通透性。结果转染HO-1C?23较空白对照HCMEC/D3细胞核HO-1蛋白表达量明显增高(P<0.05),而细胞浆HO-1表达量无明显差异(P>0.05)。与空载组及空白对照组相比,缺氧诱导后,HO-1C?23组CAV-1、CAV-2蛋白表达明显降低(P<0.05),而空载组与空白对照组之间CAV-1、CAV-2蛋白的表达无明显差异(P>0.05)。与空载组及空白对照组相比,缺氧诱导后,HO-1C?23组ZO-1、occludin蛋白表达明显增高(P<0.05),而空载组与空白对照组之间ZO-1、occludin蛋白表达无明显差异(P>0.05)。缺氧诱导后,转染HO-1C?23组的体外血脊髓屏障通透性明显低于空载组和空白对照组(P<0.05),而空载组与空白对照组相比,体外血脊髓屏障通透性无明显差异(P>0.05)。结论1、“核HO-1”能通过跨细胞途径降低了血脊髓屏障的通透性。2、“核HO-1”能通过细胞旁途径降低了血脊髓屏障的通透性。
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