【摘 要】
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目的:肝内胆管细胞癌预后极差,许多患者就诊时已失去手术机会,根治性切除率低,无手术机会的患者中位生存期仅10-12月;即便接受根治性肝切除术,肝内胆管癌患者术后5年的生存率仅约30%,术后3年复发率高达60%-70%。肝内胆管细胞癌除手术治疗外,缺乏有效治疗手段,对传统放化疗敏感性差。近年来,随着新的信号通路及治疗靶点的发现,靶向药物、免疫检查点抑制剂的临床应用,多种肿瘤的生存时间延长、预后改善,
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目的:肝内胆管细胞癌预后极差,许多患者就诊时已失去手术机会,根治性切除率低,无手术机会的患者中位生存期仅10-12月;即便接受根治性肝切除术,肝内胆管癌患者术后5年的生存率仅约30%,术后3年复发率高达60%-70%。肝内胆管细胞癌除手术治疗外,缺乏有效治疗手段,对传统放化疗敏感性差。近年来,随着新的信号通路及治疗靶点的发现,靶向药物、免疫检查点抑制剂的临床应用,多种肿瘤的生存时间延长、预后改善,但肝内胆管细胞癌的预后没有改善。因此为了提高肝内胆管细胞癌早期诊断、改善治疗及预后,需要寻找新的靶点。Ras GTPase激活蛋白负调控Ras信号通路,与多种肿瘤相关,Ras激活因子类似物3（Rasal3）是Ras GTPase家族的新成员。本实验研究Ras激活因子类似物3（Rasal3）在肝内胆管细胞癌中的表达,寻找肝内胆管细胞癌潜在的新靶点。方法:1.分析癌症基因组图谱（TCGA）数据库36例肝内胆管细胞癌患者和GTEx（V8版本）9例健康胆管组织标本的m RNA表达数据,比较Rasal3基因在两组患者间的差异表达。Kaplan-Meier曲线分析Rasal3表达与肝内胆管癌患者生存相关性。2.本研究回顾性收集了2015年1月至2020年12月期间,71例因肝内胆管细胞癌于安徽医科大学第二附属医院行根治性肝切除术的肝内胆管癌石蜡标本及癌旁组织标本。收集患者一般资料:年龄、性别及肿瘤临床病理特征:肿瘤大小、TNM分期、分化程度、淋巴结转移。采用免疫组织化学染色方法检测肝内胆管癌标本及癌旁组织标本中Rasal3蛋白表达情况。3.随机收集安徽医科大学第二附属医院21例新鲜胆管癌肝内胆管癌组织标本采用RT-PCR和Western Blot方法进一步验证肝内胆管癌细胞中Rasal3基因及蛋白的表达情况。结果:1.数据库分析发现,Rasal3在肝内胆管癌组织和癌旁组织中均表达,且在肝内胆管细胞癌组织中表达高于在正常癌旁组织中,差异有统计学意义（P＜0.05）。Rasal3高表达组肝内胆管细胞癌患者相较于低表达组患者中位生存时间短。2.免疫组化结果显示:Rasal3在肝内胆管细胞癌组织和癌旁组织中均表达,在肝内胆管细胞癌组织中表达量明显高于癌旁组织表达量,差异有统计学意义（P＜0.05）。在肝内胆管癌组织中,Rasal3蛋白表达与肿瘤直径（χ~2=6.983,P=0.008）、区域淋巴结转移（χ~2=8.812,P=0.002）、TNM分期（χ~2=7.895,P=0.005）和肿瘤分化（χ~2=2.923,P=0.003）度有关。与患者年龄、性别、BMI无相关性（P＞0.05）。3.RT-PCR和Western blot方法进一步验证肝内胆管癌组织中Rasal3基因及蛋白相对于癌旁正常胆管组织高表达。
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