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目的:观察氧化苦参碱延迟预处理对大鼠缺血再灌注心肌的影响,探究其可能的心肌保护作用及机制。方法:建立大鼠心肌缺血再灌注模型,60只SD大鼠随机分为对照组(IR组)、氧化苦参碱预处理组(OMT组)、氧化苦参碱与白屈菜红碱联合组(OC组)、白屈菜红碱处理组(CHE组)和经典缺血预适应组(IP组)。记录心率、血压、左心室功能等血流动力学参数。再灌注120分钟后,留取动脉血及心脏组织,分别检测血清中LDH、CK-MB,测定心肌组织中NO、SOD活性及MDA含量。HE染色观察心肌组织病理变化;TUNEL法检测心肌细胞凋亡情况。Pep Tag®非放射性蛋白激酶检测系统检测PKC活性。免疫印迹法(Western blotting)检测心肌细胞PKC及ATP敏感钾通道亚基的表达。采用SPSS20.0统计分析软件包分析实验结果,数据以?X±s表示,多组间均数的比较采用One-way ANOVA分析,以P<0.05为存在统计学差异的界限。结果(1)血流动力学检测:各组实验动物心率、血压稳定后,左心室收缩压(LVSP)、左室压力最大上升/下降速率(+LVdp/dtmax/-LVdp/dtmin),HR:OMT组高于IR组、IP组(P<0.05),OC组、CHE组、IP组与IR组无显著差异(P>0.05)。LVSP:OMT组高于IR组、OC组(P<0.05),OMT组与IP组无显著差异,其他组间无显著差异(P>0.05)。+LVdp/dtmax与-LVdp/dtmin:OMT组高于IR组(P<0.05),OMT组与IP组无显著差异,OC组、CHE组与IR组无显著差异(P>0.05)。(2)血清及心肌组织相关指标检测:再灌注120分钟后,OMT组LDH、CK-MB和MDA含量显著低于IR组(P<0.05),SOD含量显著高于IR组(P<0.05)。OMT组LDH及CK-MB含量低于CHE组,OMT组SOD及MDA含量无显著差异。OMT组凋亡指数AI低于I组(P<0.05),OMT组凋亡指数与IP组无显著差异(P>0.05),OC组、CHE组与IR组凋亡指数无显著差异(P>0.05)。(3)心肌组织病理学观察:①HE染色观察:和缺血再灌注组相比,氧化苦参碱预处理组心肌纤维化程度改善,但氧化苦参碱预处理未能明显改善心肌细胞肿胀、排列紊乱、炎性细胞浸润、及毛细血管扩张等情况,主要为I,Ⅱ级病理损伤。②心肌细胞凋亡观察:缺血再灌注组切心肌纤维排列松散,纹理不清,可见心肌纤维化,且视野布满呈深浅不一的棕黑色凋亡细胞(阳性细胞)。心肌细胞肿胀,仅可见少量正常心肌组织细胞。氧化苦参碱预处理组与缺血预处理组心肌细胞排列尚整齐,横纹清晰可见,细胞肿胀较轻,阳性细胞较少。各组凋亡指数:OMT组低于IR组(P<0.05)。OMT组与IP组无显著差异,OC组、CHE组与IR组无显著差异(P>0.05)(4)PKC表达及活性检测:与缺血再灌注组相比,氧化苦参碱预处理组PKC活性及PKCε表达量显著增高(P<0.05)。(5)ATP敏感性钾通道各亚基的表达:与缺血再灌注组相比,氧化苦参碱预处理组KATP亚基Kir6.1表达增强、Kir6.2表达减弱,SUR1表达增强(P<0.05),SUR2A、SUR2B表达与缺血再灌注组差异不明显(P>0.05)。结论氧化苦参碱预处理对大鼠缺血再灌注心肌损伤有显著保护作用,其机制可能为氧化苦参碱通过调节PKC的活性及ATP敏感性钾通道亚基的表达启动抗氧自由基、抗细胞凋亡等机制有关。