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关于食品中蛋白含量的测定已经有较多研究。目前食品中蛋白含量的测定方法大多都存在操作程序复杂、测定时间长、无法排除非蛋白氮的影响等问题。本论文在移动反应界面(Moving Reaction Boundary,MRB)的基础上提出了一种用于测定食品中总蛋白含量的新方法—移动反应界面滴定(Moving ReactionBoundary Titration,MRBT),对婴儿奶粉和豆浆中的总蛋白进行了测定。实验证明该方法测定速度快,精确度高,而且测定结果几乎不受非蛋白氮的影响。具体研究内容如下:1、移动反应界面滴定法测定蛋白方法的建立在本论文的第二章中,在MRB的基础上,利用OH-和蛋白质上游离酸性残基反应的原理,提出了MRBT碱滴定蛋白质,测定液体样品中总蛋白含量的方法。并利用实验证明了以下几点:(1)蛋白被完全固定在聚丙烯酰胺胶中。(2)用H+和蛋白上的碱性残基反应或者用OH-和蛋白上的酸性残基反应也都可以进行蛋白定量。(3)蛋白质以外的糖类、维生素等其它物质与OH-不发生反应,不会干扰样品中总蛋白含量的测定;(4)电压大小、背景电解质(KCl)浓度以及NaOH浓度对界面移动速度都有较大影响。2、婴儿奶粉中总蛋白含量的测定在本论文的第三章中,基于第二章设计的利用MRBT碱滴定蛋白质的方法,我们对五种婴儿奶粉中总蛋白含量进行了测定,进一步验证了MRBT法测定蛋白的可行性。实验结果显示:(1)在一定条件下,MRB在一定时间内移动的距离(D)和电泳时间(t)之间存在线性关系。(2)MRB的移动速度(VMRB)和样品中总蛋白浓度间存在较好的线性关系,因此可以通过记录MRB的移动距离,求得其移动速度,从而计算蛋白浓度。(3)加入三聚氰胺、尿素等非蛋白氮,用MRBT法测蛋白总含量不会受到非蛋白氮的影响。(4)将MRBT法和经典凯氏定氮法比较,测同一样品得到的总蛋白含量无显著性差异。(5)在同一天内重复三次实验,相对标准偏差在1.16%到7.41%之间。3、豆浆中总蛋白含量的测定在本论文的第四章中,对四种豆浆的总蛋白含量进行了测定,实验条件为第二章中经实验得到的最有条件。实验结果证明:(1)在一定蛋白浓度下,MRB的移动距离(D)和反应时间(t)呈线性关系。(2)VMRB和豆浆中总蛋白含量之间存在一定的函数关系,通过计算VMRB可以求出豆浆中蛋白总浓度。(3)三聚氰胺、尿素等非蛋白氮对MRBT法检测豆浆中总蛋白含量基本没有影响。(4)MRBT法的灵敏度与传统凯氏定氮法相近。(5)同一天内重复三次实验的相对标准偏差为0.57~4.39%。这种方法可以用于大批量样品中蛋白含量的测定。首先用凯氏定氮法测出单一样品的蛋白含量作为标准,MRBT法做出该种样品的标准曲线,剩余样品通过MRBT法测得MRB的移动速度,代入相应标准曲线来计算其蛋白质总含量。