致病微生物污染食品而引起的食物中毒是直接造成人体健康损害的主要食源性危害因素,而金黄色葡萄球菌肠毒素引起的中毒占整个细菌性食物中毒的首位,但目前尚缺乏理想的,特别是快速的检测方法,因此易造成实验室漏检和临床诊断的延误。本研究利用国家标准规定的方法(GB4789.10-2003)和PCR方法分别对采自吉林省9个地区的180份食品样品进行了检测,初步了解了我省食品中金黄色葡萄球菌的污染情况,并对两种监测方法进行了比较,以期找到一种更加快速、敏感、特异、理想的检验方法。实验结果表明,PCR方法检测出阳性样品为45份,阳性率25%,其中鱼和熟食的阳性率最高皆为40%,袋装牛奶未检出;国标法检测出阳性样品为42份,阳性率23.3%,其中散装牛奶的阳性率最高为37%,袋装牛奶和蔬菜均未检出。PCR检测法与国标法的阳性率无显著性差异(?2=3.0,P﹥0.05)。本研究所建立的PCR方法是针对金黄色葡萄球菌的耐热核酸酶编码基因(nuc基因)设计的一对引物,该基因为金葡菌所特有并且具有较高的保守性,扩增的目的片段长度为422bp。在建立PCR方法的同时,优化了反应条件,并进行了敏感性试验和特异性试验。试验结果表明,该方法的检测极限为4.32pg的金黄色葡萄球菌DNA,具有较好的敏感性;本试验用蜡样芽孢杆菌、沙门氏菌等菌种检测PCR方法的特异性,结果表明,金黄色葡萄球菌特异的扩增出目的片段,其他菌种均呈阴性反应,具有较好的特异性。PCR方法可在24小时内完成,国标法需要4~7天,可见所建立的针对金黄色葡萄球菌nuc基因的PCR方法具有较好的敏感性和特异性,较国标法更快速简便。