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背景和目的肺癌是发病率及死亡率最高的恶性肿瘤之一,其主要的病理类型为非小细胞肺癌(non-small cell lung cancer,NSCLC)。放射治疗是肺癌的重要治疗手段,据统计,约60%-70%的NSCLC患者在疾病的不同阶段需接受放射治疗。但即使是根治性放疗也不能彻底消除肿瘤,常规分割放疗(conventional fractionated radiotherapy,CFRT)2年复发率高达60%–70%,进一步提高肺癌放疗疗效是目前需迫切解决的问题。辐射抵抗严重影响放疗疗效,放疗前对患者辐射敏感程度进行评估,有助于制定最佳的放疗计划,提高放疗疗效,但目前临床缺乏敏感、有效的疗效预测分子。微小RNA(microRNAs,miRNAs)是一类保守的内源性非编码小RNA,在转录后水平调控靶基因的表达。在多种肿瘤的发生、发展过程中均起重要调控作用,最新研究发现,其与放化疗抵抗、肿瘤干细胞特性维持、上皮-间叶转化(Epithelial-mesenchymal transition,EMT)等生物学特征也密切相关。miRNAs表达具有组织特异性,在血浆中可稳定表达,并可进行定量检测分析,因此血浆miRNAs有望成为肺癌疗效预测及治疗靶点的新型分子标记。方法1.检索GEO数据库,以放疗敏感肺癌细胞株H460和放疗抵抗肺癌细胞株H1299为研究对象,获取经2Gy电离辐射后随时间变化的基因表达谱,经组织特异性分析、miRNAs预测分析、GO分析、Pathway分析等一系列生物信息学处理,获取NSCLC放疗敏感性miRNAs表达谱。结合本课题组前期研究及文献报道,筛选用于预测NSCLC患者放疗敏感性的miRNAs分子。2.收集我院拟行单纯放疗的NSCLC患者血浆,实时荧光定量PCR(qRT-PCR)法检测患者血浆关键miRNAs表达水平。按照RECIST1.1实体瘤疗效评价标准以及局部无进展生存期(progression free survival,PFS)将患者分为放疗敏感组(CR+PR;>中位局部PFS)和放疗抵抗组(SD+PD;≤中位局部PFS),比较两组间血浆miRNAs表达水平是否具有统计学差异。结果1.获得了NSCLC放疗敏感性差异基因表达谱和mRNA-miRNA-network,筛选出19个放疗敏感性相关miRNAs,其中放疗抵抗关键miRNAs14个:hsa-miR-1、hsa-miR-1297、 hsa-miR-153、 hsa-miR-193a-3p、 hsa-miR-206、 hsa-miR-302e、hsa-miR-328、 hsa-miR-372、 hsa-miR-495、 hsa-miR-520a-3p、 hsa-miR-520b、hsa-miR-520d-3p、hsa-miR-520e、hsa-miR-613;放疗敏感关键miRNAs5个:hsa-let-7c、hsa-miR-137、hsa-miR-203a、hsa-miR-34c-5p、hsa-miR-98。结合前期研究成果,共筛选获得4个miRNAs用于后续实验(hsa-let-7c、hsa-miR-18a、hsa-miR-495、hsa-miR-203a)。2.入组行单纯放疗NSCLC患者39例,按近期疗效分组,放疗敏感组18例,放疗抵抗组21例。放疗敏感组中hsa-let-7c、hsa-miR-18a的表达水平显著高于放疗抵抗组(P<0.05),放疗抵抗组与放疗敏感组相比,hsa-miR-495、hsa-miR-203a的表达无统计学差异(P>0.05)。3.随访截止2014年3月15日,8例患者因疾病未进展删失。中位局部PFS4个月(1-9.2个月),按照中位局部PFS分组,放疗敏感组14例,放疗抵抗组17例,放疗抵抗组与放疗敏感组相比,hsa-let-7c、hsa-miR-18a、hsa-miR-495、hsa-miR-203a的表达差异均不具统计学意义(P>0.05)。结论hsa-let-7c、hsa-miR-18a血浆表达水平与NSCLC放疗近期疗效呈正相关,可作为NSCLC放疗疗效预测的新型分子。