【摘 要】
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冰核细菌是自然界冰核活性最强的异源冰核,已成为一种重要的生物资源,利用冰核细菌促冻杀虫在理论已确凿无疑,但由于野生型冰核细菌不能在昆虫肠道内稳定定殖以及在田间施放
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冰核细菌是自然界冰核活性最强的异源冰核,已成为一种重要的生物资源,利用冰核细菌促冻杀虫在理论已确凿无疑,但由于野生型冰核细菌不能在昆虫肠道内稳定定殖以及在田间施放后易诱发作物霜冻害的原因,难以应用野生型冰核细菌冻杀田间和仓储越冬害虫.该研究利用转座酶基因位于转座单位以外的微转座子载体,将冰核基因iceA克隆入该载体中,构建了携带该基因的、具有广泛宿主接合转移特性和Tn5转座功能的自杀性质粒pTnicel.应用实验结果表明,所构建的基因工程菌,在害虫肠道内能稳定定殖增生,能够提高高虫体的过冷却点,冻杀害虫效果显著.本项研究首次构建了解携带冰核基因iceA的自杀性质粒pTnicel,该质粒可以通过接合转移和Tn5转座作用将iceA整合到多种革兰氏阴性菌的染色体DNA上,该质粒的构建成功,将会加速中国冰核基因的应用研究.该研究采用与国外完全不同的实验手段,首次获得了生物安全型促冻杀虫基因工程菌.该工程菌的获得,解决了阻碍冰核细菌促冻杀虫应用中的难题,有希望创制出一种新型生物农药,为防治中国北方地区重要农林果树和仓储越冬害虫探索出一条切实可行的生防新途径.
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