预测食管鳞癌放化疗疗效及预后的差异蛋白ILK的发现及功能鉴定

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目的:筛选预测食管鳞癌放化疗疗效及预后相关血清差异蛋白;并在食管鳞癌细胞系对显著相关蛋白进行功能鉴定。方法:1.纳入52例食管鳞癌患者,规范同期放化疗,进行疗效评价及随访,同时收集患者治疗前、后血清。2.利用同位素标记相对和绝对定量(iTRAQ)技术筛选与放化疗疗效及预后相关差异蛋白。3、使用RNA干扰慢病毒感染实验细胞株,消减ILK基因表达后,通过Celigo、MTT、FACS等检测明确ILK基因消减对细胞增殖、凋亡的影响。结果:1.近期疗效评价:放化疗敏感组(CR+PR+SD)食管鳞癌患者占59.62%(31/52例);放化疗抗拒组(PD)占40.38%(21/52例)。远期疗效随访结果:生存期1-2年组占46.15%(24/52例);生存期2-3年组占32.69%(17/52例);生存期≥3年组占21.15%(11/52例)。2.ILK在食管鳞癌患者放化疗前比对正常健康对照组上调(r=4.386,p<0.05);放化疗敏感组比对放化疗抗拒组表达下调(r=0.587,p<0.05);生存期≥3年比对生存期1-2年组下调(r=0.633,p<0.05)。3.筛选ILK高表达的食管鳞癌细胞株TE-1,经慢病毒感染后,实验组TE-1细胞中ILK基因在mRNA水平的表达量受到抑制(p<0.05),敲减效率达到88%。抑制ILK基因的表达后,在细胞系中发现发生凋亡的细胞数目增多,食管鳞癌细胞的增殖变慢,食管鳞癌细胞的克隆数目减少。结论:ILK具有预测食管鳞癌放化疗疗效及预后的潜在价值;ILK基因的沉默抑制了食管鳞癌细胞的增殖,促进了食管鳞癌细胞的凋亡。
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