黑曲霉UB52产植酸酶及酶学特性研究

来源 :中国农业大学 | 被引量 : 0次 | 上传用户:hydhyd112
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本文对黑曲霉进行诱变及诱变菌株的最佳产植酸酶条件优化、产酶动力学、植酸酶的纯化和酶学性质的研究;对植酸酶的最佳包被条件及其体外消化实验进行了探讨。 以黑曲霉S306为出发菌株,采用紫外、溴化乙锭以及两者的复合诱变,经多轮诱变得到一株液态发酵产酶活力为4700u/ml的菌株(UB52),其遗传性状稳定。 在获得到诱变菌株(UB52)最佳发酵营养条件的基础上,对三角瓶和10L罐中的最佳培养条件进行研究。10L罐在最佳条件下生物量达1.19g干重/100ml发酵液,最高酶活达到5800u/ml发酵液,并建立发酵动力学模型预测发酵过程。 对黑曲霉UB52液态发酵所产粗酶采用Sephadex G-100凝胶层析和DEAE-52离子交换柱层析分离,得到纯化的酶,经SDS-PAGE检验为单一谱带,相对分子量为63KD,该植酸酶的等电点pI为4.5,以植酸钠为底物的米氏常数Km为0.31mmol/L。植酸酶氨基酸分析结果显示含酸性氨基酸多,碱性氨基酸少,这和其等电点偏酸性是一致的。 以微孔淀粉为载体,采用流化床干燥法,对植酸酶进行了包被研究,通过正交实验,包被最优条件为:蔗糖的添加量为植酸酶重量5%,盐用量为淀粉重量的10%,明胶用量为淀粉量的1.5%。对包被的植酸酶进行体外消化试验显示:添加包被植酸酶的21日龄日粮消化透析液中氨基酸、微量元素及磷的含量都较添加裸植酸酶的对照样高13.6%、32.6%、12.0%。
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