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目的:1.检测青蒿素（Artemisinin,AS）及其衍生物对大肠杆菌和金黄色葡萄球菌的抗菌活性。2.探讨双氢青蒿素（Dihydroartemisinin,DHA）与头孢呋辛（Cefuroxime,CFX）和氨苄青霉素（Ampicillin,AMP）联用对大肠杆菌的协同抗菌作用及其机制。3.检测DHA与CFX联用对金黄色葡萄球菌的抗生物膜作用。方法:检测AS及其衍生物对大肠杆菌和金黄色葡萄球菌的抗菌活性。1.采用平皿打孔法和微量肉汤稀释法检测AS、青蒿琥酯（Artesunate,AR）和DHA在不同浓度和不同作用时间（8,16,24,32h）对大肠杆菌和金黄色葡萄球菌的抗菌效果,并分别以链霉素和青霉素为阳性对照药。2.研究DHA与CFX和AMP对大肠杆菌的协同抗菌作用及其机制。实验采用微量肉汤稀释法和2,3,5-氯化三苯基四氮唑法（2,3,5-Triphenyl-2H-Tetrazolium Chloride,TTC）法确定DHA、CFX、AMP对大肠杆菌的最低抑菌浓度（Minimum inhibitory concentration,MIC）和最低杀菌浓度（Minimum bactericidal concentration,MBC）;棋盘稀释法确定DHA与CFX和AMP对大肠杆菌的分级抑菌浓度指数（Fractional inhibitory concentration index,FICI）,在确定具有协同作用之后,选取DHA与CFX联用探讨其对大肠杆菌的作用机制。通过微量肉汤稀释法检测DHA与CFX对大肠杆菌生长曲线的影响;聚丙烯凝胶电泳观察联用后对总蛋白谱带的变化;电导率法检测对细胞膜和细胞壁完整性的影响;碱性磷酸酶（Alkaline phosphatase,AKP）试剂盒检测对细菌细胞壁通透性的影响;电子显微镜（Scanning electron microscope,SEM）观察对细菌形态结构影响;荧光定量PCR检测大肠杆菌对外排泵相关基因（mdt C和acr B）和超氧压力相关基因（sox S）基因的影响。3.DHA与CFX联用对金黄色葡萄球菌的抗生物膜作用。采用结晶紫半定量法检测金黄色葡萄球菌24 h和48 h形成生物膜的能力;微量肉汤稀释法检测DHA与CFX对金黄色葡萄球菌的MIC和MBC;棋盘稀释法检测DHA与CFX联用后对金黄色葡萄球菌的FICI;棋盘稀释法检测DHA联合CFX抗金黄色葡萄球菌协同抗24 h的生物膜分级抑菌浓度指数（Fractional biofilm inhibitory concentration index,FBICI）;棋盘稀释法检测50μmol·L-1DHA和500μmol·L-1DHA联用CFX抗金黄色葡萄球菌作用。结果:1.平皿打孔法检测发现,与5 mmol·L-1AR和DHA不同,5 mmol·L-1AS 24 h对大肠杆菌无明显抑菌圈出现。肉汤稀释法发现,DHA对大肠杆菌的抗菌活性比AR和AS都强,24 h的IC50为155.9μmol·L-1,AR为370.0μmol·L-1,而AS没有发现抗菌活性。AR和DHA的抗菌活性均在16～24 h最强,而AS的抗菌活性则出现在8～16 h。对于金黄色葡萄球菌,DHA没有检测到明显的抗菌活性。2.结果得出DHA、CFX和AMP的MIC分别为300,25,25μmol·L-1,CFX的MBC为25μmol·L-1,DHA（MBC）>600μmol·L-1。DHA与CFX联合和DHA与AMP联合FICI分别为0.375和0.75,表现为协同作用或加和作用。从时效曲线可以得出两药联用后对大肠杆菌的作用明显强于DHA和CFX各自单用的,说明DHA联用后,可以减少CFX的使用量。继而研究DHA与CFX协同抗菌的机制:聚丙烯凝胶电泳结果显示,两药联用的条带比各自单用的更浅,有的谱带甚至消失,说明两药联用后对总蛋白谱带具有明显的抑制作用;电导率法结果显示,两药联用后菌液的电导率值明显增高;AKP检测显示,联用组碱性磷酸酶渗漏最为明显,提示菌体完整性可能受到破坏;扫描电子显微镜结果显示,两药联用后对大肠杆菌形态的破坏作用比单独用药组强;荧光定量PCR结果显示,两药联用能抑制大肠杆菌超氧压力反应相关基因（sox S）的表达。3.结晶紫半定量法结果显示,与对照组相比,金黄色葡萄球菌24 h有生物膜形成,随着时间延长到48 h,形成生物膜能力加强;微量肉汤稀释法结果得出DHA对金黄色葡萄球菌的MIC和MBC均>600μmol·L-1,而CFX对金黄色葡萄球菌的MIC和MBC分别为3.125μmol·L-1和25μmol·L-1,棋盘稀释法得出50μmol·L-1和500μmol·L-1 DHA与CFX联用对金黄色葡萄球菌生物膜的FBICI≤0.5,均表现出协同抗金黄色葡萄球菌生物膜的作用,且DHA高浓度时比低浓度协同抗金黄色葡萄球菌生物膜的效果强。结论:1.AS、AR和DHA对大肠杆菌的抗菌活性为DHA>AR>AS;AS与其衍生物表现出不同的抗菌动力学特征,DHA对金黄色葡萄球菌没有明显抗菌活性。2.DHA与CFX联用具有协同作用。其机制为抑制蛋白质总量,破坏细菌形态结构和抑制细菌的多药外排系统相关基因的表达。3.不同浓度DHA与CFX联用均对金黄色葡萄球菌能显示出协同抗菌和抗生物膜的作用,且高浓度效果更好。