目前，临床输血一般以室温保存（20-24℃摆动保存）作为血小板保存的标准方法，因为它较有利于保持血小板功能，提高其体内存活时间及回收率。然而，这种方法存在血小板制品污染的风险，使得血小板的保存期仅仅只有5d。另外，这一条件也有利于血小板制品中残留的白细胞产生多种细胞因子，如TGF-β、RANTES、IL-1β和IL-8等，可引起相关的输血反应。-80℃深低温保存血小板虽然解决了血小板制品细菌污染的问题，延长了保存期，但由于它对使用操作、贮存和运输有特殊要求，很难作为血小板贮存的一种标准操作方法，另外，低温保护剂二甲基亚砜（DMSO）对受者有毒副作用，在冷冻和洗涤去除的过程中又极易引起血小板的活化损伤，导致输注后在受者体内的回收率降低和寿命缩短。因此，探索血小板4℃冷藏保存已成为一项非常有意义的课题。其意义主要在于：1)降低了血小板制品5天保存产生细菌污染的风险，使血小板的保存期延长，极大地方便了血小板的供给。2)4℃冷藏保存条件与目前红细胞保存相同，血小板和红细胞制品可以共同利用现有的设备和资源，省去了室温保存所特需的设备。3)如果用4℃保存添加液替代血浆，保存血小板，不仅有利于血小板制品的病毒灭活，还可以节省血液资源用于血浆蛋白制品的生产。国内对血小板4℃冷藏保存已做了初步尝试。但对于人血小板的冷藏保存，特别是保存添加液条件下的研究，尚未见报道。本研究首先选择和建立血小板功能和活力的体外检测方法，进而利用这些方法，比较了4℃冷藏保存条件下血小板形态、代谢和活化的相关指标相对于室温保存的不同变化趋势，并分析其可能机理，为最终确定最佳保存条件奠定基础。根据实验结果，冷藏保存血小板在血小板数、形变程度（ESC）、低渗休克（HSR）、pH值这4项指标上表现出与室温保存的显著性差异，而表面P-选择素和GPIb_a的表达无显著性差异。表明血浆可能不是血小板冷藏保存的最佳介质，而合适的保存添加液有可能提高冷藏血小板的体外活力和功能。虽然目前有一些已经应用于临床的适合室温保存的血小板保存添加液，如血小板保存添加液Ⅲ（PAS-Ⅲ），但我们的实验结果证明它并不适合4℃条件下的血小板保存。为减少低温对血小板的损伤，必须寻找能抑制或阻断血小板冷藏损伤的相关因子。将甘露醇、腺嘌呤、葡萄糖及Mg²⁺、K⁺分别单独添加到PAS-Ⅲ中，实验结果发现除葡萄糖外，单独添加了以上其他因子的PAS-Ⅲ，在4℃冷藏条件下其保存的血小板体外质量优于原PAS-Ⅲ中血小板。葡萄糖甘露醇腺嘌呤血细胞保存添加液（GMA）是包含上述几种添加因子的血细胞保存添加液，将GMA与PAS-Ⅲ分别在冷藏条件下保存血小板，结果发现GMA-PC_s在保存至5d的平均血小板体积（MPV）、pH、HSR、P-选择素及IL-6各项体外检测指标都优于PAS-Ⅲ-PC_s，提示用GMA对4℃冷藏血小板的保存效果优于PAS-Ⅲ。本研究进而比较了不同的血浆比例对4℃冷藏保存血小板的影响，确定35％的ACD血浆就足以提供血小板4℃冷藏保存所需的生理环境和代谢能量。最后，根据添加因子筛选的结果，调整了GMA中K⁺的浓度，并去除了葡萄糖，最后形成了保存添加液PAS-R₁。与目前室温保存血小板相比，用PAS-R₁冷藏保存的血小板其血小板计数、pH值、MPV、P-选择素、磷脂酰丝氨酸（PS）表达、HSR及ESC与前者均无显著性差异，而乳酸的生成与前者相比显著减少。表明这种保存添加液可作为4℃冷藏保存血小板的基础保存添加液。另外，为了探索4℃冷藏保存血小板输入体内后易被血流清除的分子机制，本研究在体外初步建立了THP-1细胞吞噬血小板的实验模型，比较4℃冷藏保存条件下，保存添加液与血浆中血小板被单核巨噬细胞吞噬的比例，发现用保存添加液PAS-R₁冷藏保存5d的血小板其吞噬率与血浆中血小板无显著差异。通过分析冷藏保存5d的血小板的清除率与其表面分子PS、膜糖蛋白GPⅠba表达的关系，发现GPⅠba在质膜上表达的强度与血小板的体外吞噬率具有相关性，而PS在血小板膜上的外翻与血小板短期内被吞噬清除可能并无关联。进一步研究冷藏血小板与特异性吞噬细胞的分子间相互作用，将为4℃冷藏保存血小板易被吞噬清除机制的研究提供实验依据，为将来在此基础上添加合适的保护剂，抑制血小板被吞噬清除，从而对冷藏保存的血小板提供全面保护打下基础，也为血小板4℃冷藏保存添加液的进一步研制开辟了更广阔的道路。