目的建立RAW264.7源性巨噬细胞M1表型极化模型,评价白藜芦醇（Res）抑制巨噬细胞向M1表型极化的效果及作用机制,为临床研究提供实验依据。方法1.建立LPS+IFN-γ诱导RAW264.7源性巨噬细胞向M1表型极化模型,评价Res药效利用LPS+IFN-γ联合诱导RAW264.7源性巨噬细胞,使其极化成M1表型巨噬细胞模型,形态学观察对照组与模型组细胞形态;流式细胞术检测对照组与模型组M1型巨噬细胞表型标记物CD11c+表达情况进行模型鉴定。在造模成功的前提下Res进行药物干预。CCK8、LDH流出实验评价药物剂量毒性;形态学观察各实验组细胞形态;流式细胞术检测M1型巨噬细胞表型标记物CD11c+表达;RT-q PCR检测M1表型巨噬细胞分泌的促炎性因子（IL-1β、TNF-α、IL-6）m RNA表达;ELISA检测各组细胞上清液中M1表型巨噬细胞分泌的促炎性因子IL-1β、TNF-α、IL-6的含量;NO试剂盒检测各组细胞上清液中M1表型巨噬细胞分泌的NO的含量。2.机制分析与验证利用RT-q PCR法和Western Blot检测TLR4/NF-κB/HIF-1α通路上的相关因子m RNA及蛋白的表达研究机制;加入HIF-1α激动剂（Co Cl₂）,重复检测实验一中指标,对比分析Res组与Res+Co Cl₂组的差异。明确Res抑制巨噬细胞向M1表型极化与HIF-1α相关。结果1.Res对LPS+IFN-γ诱导RAW264.7源性巨噬细胞向M1表型极化的药效评价（1）光镜下观察RAW264.7源性巨噬细胞形态上的变化:未激活的巨噬细胞小且圆,模型组与对照组相比,模型组大部分细胞仍呈圆形,但体积增大而饱满,胞质增多,符合M1表型巨噬细胞特征,表明本实验选用的造模方法可行;Res干预组较模型组小而圆的巨噬细胞数量增多;（2）模型组M1型巨噬细胞表型标记物CD11c+表达量较对照组显著上调（P<0.01）,表明本实验选用的造模方法可行;经不同浓度的Res干预后,M1型巨噬细胞表型标记物CD11c+表达量较模型组有不同程度的下降,表现出一定的药物浓度依赖性,以Res高浓度组效果最佳（P<0.01）;（3）模型组M1表型分泌的IL-1β、IL-6、TNF-α的m RNA表达量较对照组显著上调（P<0.01）;经不同浓度Res干预后,IL-1β、IL-6、TNF-α的m RNA表达量较模型组均下调,组间差异有统计学意义（P<0.05）,呈药物浓度依赖性,以Res高浓度组效果最佳（P<0.01）;（4）模型组细胞上清液中M1表型分泌的IL-1β、IL-6、TNF-α含量较对照组显著上调（P<0.01）;经不同浓度Res干预后,细胞上清液中IL-1β、IL-6、TNF-α含量较模型组均下调,表现出一定的药物浓度依赖性,以Res高浓度组效果最佳（P<0.01）;（5）模型组细胞上清液中M1表型分泌的NO含量较对照组显著上调（P<0.01）;经不同浓度Res干预后,细胞上清液中NO含量较模型组下调,表现出一定的药物浓度依赖性,以Res高浓度组效果最佳（P<0.01）。2.基于TLR4/NF-κB/HIF-1α通路探究Res对LPS+IFN-γ诱导RAW264.7源性巨噬细胞M1表型极化的机制（1）模型组TLR4、HIF-1αm RNA表达量较对照组均显著上调（P<0.01）,经不同浓度Res干预后,TLR4、HIF-1αm RNA表达量较模型组均下调,组间差异具有统计学意义（P<0.01）,呈药物浓度依赖性,以Res高浓度组效果最佳（P<0.01）。模型组TLR4、p-NF-κB p65、HIF-1α蛋白表达水平较对照组均显著上调（P<0.01）,经不同浓度Res干预后,TLR4、p-NF-κB p65、HIF-1α蛋白表达水平较模型组下调,以Res高浓度组效果最佳（P<0.01）。结合RT-q PCR及Western Blot结果表明,Res可有效下调TLR4/NF-κB/HIF-1α通路上m RNA及蛋白的表达,以Res高浓度组效果最佳;（2）明确Res抑制RAW264.7源性巨噬细胞向M1表型极化确与HIF-1α相关:结合流式细胞术检测M1型巨噬细胞表型标记物CD11c+表达;RT-q PCR检测M1表型分泌的促炎性因子（IL-1β、TNF-α、IL-6）m RNA表达;ELISA检测各组细胞上清液中M1表型分泌的IL-1β、TNF-α、IL-6的含量;NO试剂盒检测各组细胞上清液中M1表型分泌的NO的含量,实验结果均表明Res可有效抑制巨噬细胞向M1表型极化,Co Cl₂可促进巨噬细胞向M1表型极化,对比Res+Co Cl₂组与Res干预组,Res抑制巨噬细胞向M1表型极化的效果被Co Cl₂抵消。提示Res抑制巨噬细胞向M1表型极化确与HIF-1α相关。结论1.Res可抑制巨噬细胞向M1表型极化,且表现出一定的药物浓度依赖性,以Res高浓度组效果最为显著。2.Res可下调TLR4/NF-κB/HIF-1α通路上m RNA及蛋白的表达,利用HIF-1α激动剂干预后,药效受到明显抑制,提示Res抑制RAW264.7源性巨噬细胞向M1表型极化与TLR4/NF-κB/HIF-1α通路相关。