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目的：NO3-是旱地植物吸收氮素的主要形式，硝酸还原酶（NR）作为NO3-同化过程中的第一个关键酶，对作物的氮代谢等有着重要影响。硝酸还原酶活性(NRA)在氮代谢调节中存在着随昼夜光暗条件改变而改变的规律。 方法：实验设计用组织培养方法获得基因型一致的烟草植株，用水培法培养实验材料，分别在烟草的生根期、成苗期、伸根期、旺长期、成熟期这五个主要生育期内，在24h内每间隔3h动态测定烟草叶部NRA，NRA的测定采用活体法；NR基因的相对表达量采用实时荧光定量（RT-PCR）技术检测。 结果：（1）在一个昼夜周期内，在烟草生长发育的各主要生育期，其叶片NRA总体上表现出白天高于晚上的趋势，即在恒定的光暗调节下NRA表现出自主节律性；（2）烟草各生育期叶部NRA的日变化存在差异，各生育期间NRA最大值表现的时期有所不同，但总体上表现为在18:00时NRA最高；（3）高、低两种浓度供氮水平下测定烟草叶部NR基因的相对表达量及NRA，结果出现不一样的规律，但均表现为在酶活性和基因相对表达量峰值附近的时间点处关系复杂。 结论：（1）烟草各生育期叶部NRA均在存在近似近日节律性的特点，各生育期叶部NRA最大值总体为18:00时最高；（2）在整个生育期中，烟草叶片NRA开始较高，之后逐渐降低，到旺长期达最低，之后有所升高。（3）烟草24h的昼夜周期中，NR基因相对表达量和NRA之间存在时间滞后性或负相关性。