利用木糖发酵产微生物油脂的菌种筛选及应用基础研究

来源 :合肥工业大学 | 被引量 : 0次 | 上传用户:yinyueemo1122334
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本论文通过自筛获得能高效利用木糖生产微生物油脂的微生物,针对性状优良和产油率高的菌株进行了发酵优化,并进行了替代碳源制备和药用辅料的初步探究,具体结论如下:(1)从安徽省各区域代表城市的牛排泄物中通过平板初筛,摇瓶发酵得到14株微生物,通过基因测序、生理生化分析等手段进行菌种鉴定,综合产油率、木糖利用率和获得的油脂组分得到一株产油率高(15.65%)、木糖利用率高(68.56%)、油脂组分较为单一(亚油酸占比82.8%)的微生物,并命名为篮状菌GLY-3,针对该微生物进行了后续研究;(2)以篮状菌GLY-3发酵获得微生物油脂,采用单因素实验确定了最佳培养基组成:最适氮源为蛋白胨(产油率高)和酵母提取物(生物量高),蛋白胨:酵母提取物=1:2(w/w),木糖浓度为15g/L,C/N为150;最优发酵条件:装液量50m L/250m L,发酵天数6d,p H为7.0,温度为30℃,摇床转速为210 r/min,接种量为6%;在单因素的基础上采用Box-Behnken中心组合设计得到了发酵条件的最佳组合:装液量55m L/250m L、发酵天数6d、p H为7.0,接种量6.7%,优化后产油率达25.04%,与优化前(15.65%)相比提高了60.21%;(3)以秸秆不同预处理方式下木质素的去除率和酶解糖化液糖含量为指标,发现最适的秸秆预处理方式为本课题组的三氧化硫微热爆预处理技术,在此基础上通过单因素优化确定了酶解最佳条件:以10g稻草秸秆为底物,木聚糖酶液(1.0g/L)添加量为2m L,固液比为1:10,酶解温度为45℃,酶解时间为30h,酶解后糖化液中木糖浓度为16.06g/L,葡萄糖1.69g/L;(4)以酶解糖化液作为篮状菌GLY-3发酵的替代碳源,对获得的油脂进行了酸值、皂化值、碘值、过氧化物值分析,结果符合《中华人民共和国药典》单亚油酸甘油酯作为辅料的要求,为后续该油脂的药用研究提供了新思路。
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