胶质瘤是起源于胶质细胞的肿瘤，是人类中枢神经系统最常见的原发性肿瘤。即使经过目前认为的最佳方案治疗，如外科手术、放疗、化疗等，大多数胶质瘤，尤其是级别较高者，总体上预后还是较差。因此，有必要进一步研究胶质瘤发生机制并寻找治疗的靶子。目前关于胶质瘤的研究重点之一就是力求发现胶质瘤的致病基因。为探讨胶质瘤发病机制，本课题对一组胶质瘤标本中PEG3和plakoglobin两个基因的表达情况进行了研究。 第一部分 胶质瘤中PEG3基因的表达研究 PEG3(Paternally Expressed Gene 3，父性表达基因3)是一个印迹基因，只有来源于父方的等位基因才表达。PEG3基因编码一个高分子量的C2H2型锌指蛋白，该蛋白可能是一种转录因子。PEG3基因在脑、胎盘、卵巢、睾丸、胰腺等组织中表达，PEG3蛋白位于神经元和神经胶质细胞的细胞核内。既往功能研究提示PEG3可能是一个凋亡促进因子并可能参与调节肿瘤坏死因子(TNF)信号传导通路。 人类PEG3基因位于19q13。有报道表明，一些胶质瘤中频发19q杂合性缺失，其共同缺失区位于19ql3。有研究者将9个胶质瘤细胞系与原代培养的星形胶质细胞的PEG3基因表达水平作比较，发现其中4个细胞系的PEG3基因表达水平显著下调。另有研究者将＊＊＊3 基因的C＊＊A转染入来源于同一个胶质瘤细胞系的5个克隆中，5个克隆均失去停泊非依赖性生长，且转染后的细胞株失去了母株在裸鼠体内成瘤的特性。由此提示，PEG3基因可能是胶质瘤的一个候选抑瘤基因。 一般而言，确定一个基因是否是抑瘤基因，理论上需符合三个基本条件：（1）该肿瘤相应的正常组织中，该基因必须正常表达；G）该肿瘤中，此基因应有表达缺陷或结构改变或功能失活；o）将该基因的野生型导入该基因异常的肿瘤细胞内，可部分或全部改变肿瘤细胞的恶性表型。尽管己有报道表明PEG了 基因在部分胶质瘤细胞系中表达下调，但迄今未见胶质瘤临床标本中PEG3 基因表达情况研究的报道。鉴于细胞系在体外长期传代培养过程中，可能发生某些遗传学改变，故有必要在临床标本中研究PEG3基因表达情况。 本研究中收集了快速冷冻的81例胶质瘤（包括9例1级星形细胞瘤、26例11级星形细胞瘤、15例Ill级间变型星形细胞瘤、6例 IV级胶质母细胞瘤、6例＊级少突胶质细胞瘤、5例＊级室管膜细胞瘤、3例＊级间变型室管膜细胞瘤、7例＊级混合型胶质瘤、4例＊ 一见一 t／ 上J级间变型混合胶质瘤）标本和门例正常脑组织标本（取自无任何肿瘤和遗传病史的脑外伤和高血压脑溢血患者施行开颅手术的入路人采用了TRIZd试剂／氯仿／异丙醇抽提组织总RNA，并将其溶于无核酸酶水中。总RNA经过DNase消化、TRIzol试剂再拍提、浓度与纯度检测后，进行逆转录反应。以GAPDH基因作为内对照，进行PCR扩增，扩增产物采用琼脂糖凝胶电泳检测分析。每个标本的PCR扩增及电泳检测至少进行两次以证实结果。 结果显示，从组织中提取的RNA质量达到RTPCR的要求。所有11例正常脑组织的PEG3表达水平稳定；6例少突胶质细胞瘤中有2例未检测到PEG3基因的表达。与正常脑组织比较，其它各亚型胶质瘤标本中PEG3基因的表达水平无明显改变。重复进行PCR扩增及电泳检测验证了上述结果。 基于实验结果，我们得出以下结论： 二．PEG在正常脑组织中有表达。 2．一些（本组2／6例）少突胶质细胞瘤中不表达N对人提b＝＝nr’nH 可能在这种亚型胶质瘤发生过程中起作用。 3．其他亚型胶质瘤中，在RNA水平上未见有显著性意义的 PEG3表达改变，故推测PEG3可能不是这些亚型胶质瘤的 主要抑瘤基因。 据我们所获资料，这是关于研究PEG3基因在胶质瘤临床 ．IV．标本中表达情况的首次报道。 第二部分胶质瘤及髓母细胞瘤中P咖ledlb 基因的表达 plakoglobln（巨Y－catenln，或Junction pl狄oglobin，JUP）是细胞内糖蛋白比tenin（连环蛋自）家族成员。与其同源蛋自卜catenin相似，plakoglobin以游离型印可溶性）及膜结合两种形式存在于细胞内。 以膜结合形式存在时，plak。gobin参与构成两种细胞间连接结构，即桥粒和粘着连接，是钙粘蛋白 ＊adherin）和细胞骨架蛋白连接的桥梁。钙粘蛋白是一类比“依赖性跨膜细胞粘附分子，能介导细胞与细胞间的粘附，在组织形态发生和自稳态维持方面起重要作用。钙粘蛋白胞外区可识别邻?