小鼠脊髓源神经干细胞与人骨髓间充质干细胞定向诱导为运动神经元的实验研究

被引量 : 1次 | 上传用户:yeyeye5122
下载到本地 , 更方便阅读
声明 : 本文档内容版权归属内容提供方 , 如果您对本文有版权争议 , 可与客服联系进行内容授权或下架
论文部分内容阅读
目的:本部分实验旨在通过干扰miR-31诱导小鼠脊髓源神经干细胞向运动神经元分化,探讨干扰miR-31对神经干细胞向运动神经元分化的影响的同时,进一步检测miR-615, miR-126,miR-128三种基因的表达变化,探讨该三种基因在miR-31基因被干扰后可能发挥的作用及它们与miR-31可能存在的作用关系。方法:将怀孕14-15天的昆明小鼠麻醉后取出胚胎小鼠,逐层剥离取出脊髓组织后制备成单细胞悬液,待原代细胞球大量形成并应用免疫细胞化学技术检测Nestin呈阳性表达后,分为四组:第一组添加入mmu-miR-31Anti-miRTMmiRNAInhibitor,第二组加入Anti-miR Negative Control#1,第三组由培养瓶中接种到六孔板里后,加入DMEM/F12培养基,第四组为完全空白组,即继续在培养瓶中培养。按照以上分组方法处理后置于37℃,5%CO2培养箱中孵育3天。3天后分别提取以上分组中细胞的总RNA,应用荧光定量PCR技术及免疫细胞化学技术分析四个分组中运动神经元标记物ChAT基因的表达变化,并同时运用PCR技术检测miR-615,miR-126,miR-128三种miRNA基因的表达变化。结果:小鼠胎鼠脊髓源神经干细胞经干扰miR-31诱导后,免疫细胞化学检测及荧光定量PCR技术均可见运动神经元的标记基因ChAT表达显著增高,同时miR-615,miR-126,miR-128三种miRNA也在miR-31被干扰后表达显著增高结论:小鼠脊髓源神经干细胞具有向运动神经元分化的潜能,干扰miR-31可以定向诱导脊髓源神经干细胞向运动神经元分化,干扰miR-31可以对miR-615、miR-126、miR-128三种miRNA的表达产生了影响,并共同参与了对神经干细胞定向向运动神经元分化的调控。目的:本部分实验通过离心分层所采集的人体骨髓血分离并获得了人骨髓间充质干细胞,并通过体外培养使其大量增殖与分化,为了解其分化特点及定向诱导其向运动神经元方向分化提供了充分的细胞来源。并在此基础上通过采用全反式维甲酸(RA)与音猬因子(Shh)联合诱导人骨髓间充质干细胞定向向神经干细胞乃至运动神经元方向分化,观察其在分化过程中Nestin与Hb9的表达变化情况。方法:采用离心分离法获得人骨髓间充质干细胞,体外培养使其大量扩增后使用含有RA与Shh的诱导液处理,应用免疫细胞化学及荧光定量PCR方法分析Nestin与Hb9表达的变化情况。结果:人骨髓间充质干细胞经过RA与Shh诱导后Nestin与Hb9的表达明显高于未加RA与Shh的对照组及空白组。结论:hBMSC具有向神经干细胞乃至运动神经元方向分化的潜能。RA与Shh可以在体外诱导hBMSC定向向该方向分化。
其他文献
目的中国是最讲养生之道的国家。养生,在先秦时已被我国人们广为重视,其热爱程度尤以楚地为盛。可是长期以来,学术界较少在中华古代文化背景下去研究先秦养生思想,全面审视先秦楚
皮肤色素沉着是皮肤科的疑难之症,例如黄褐斑、老年斑、雀斑、黑变病、颜面黑痣、胎斑等,严重影响着美容。现代生活中,随着人们生活水平的日益提高,美白祛斑渐渐变成了一个很热门
以由3-(甲基丙烯酰氧)丙基三甲氧基硅烷(MPS)表面修饰过的SiO2为无机粒子,聚己内酯二醇、甲基丙烯酸羟乙酯和异佛尔酮二异氰酸酯为聚氨酯(PU)前驱体,甲基丙烯酸甲酯、甲基丙烯酸和
第一部分2型糖尿病大鼠及十二指肠空肠旁路术动物模型的建立及评价背景糖尿病是最常见的慢性病之一,其中2型糖尿病(Type2diabetes mellitus,T2DM)占90%以上。2011年,全球糖尿
目的:探讨健康宣教对血液透析患者的作用。方法:选择112例肾功能障碍需要血液透析的患者,将上述患者随机分为对照组、观察组56例,对照组患者采用医院一般的医生叮嘱,告诉患者治
随着“云”概念的兴起,云存储、云计算、云视频、云安全等云服务成为了炙手可热的红人。而在这股云浪潮的背后,则是各大云服务提供商建立的大型数据中心,通过成千上万的服务
公共信息标识导向在当代城市空间扮演着越来越重要的角色,成为城市环境空间中一道亮丽的风景线。本次方案以天津滨海一号温泉度假酒店为视角,为这一综合性酒店的公共信息导向
电力是准公共物品,供电服务是公共服务的组成部分。与其它公共服务情况相似,沧州受城乡发展不平衡的影响,城乡供电服务质量差距较大,这种差距加速了区域间经济发展不平衡,诱
对外汉语初级阶段综合课是对外汉语初级阶段教学的主干课程,优秀的初级综合教材往往体现了当时先进的教学理念。初级教材适用于基础阶段,相对于中级及高级阶段来说拥有更多的
在我国,在公开经营的棋牌室内进行"少量财物输赢"的活动被认为是娱乐,抽奖式有奖销售、有奖竞猜被认为是正常的商业促销手段,德州扑克大赛被包装为体育竞赛。但它们本质上属