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目的:通过更接近真实体内给药环境的血清药理学方法证明复方黄黛片能够通过诱导细胞凋亡途径治疗慢性粒细胞白血病,为复方黄黛片拓展应用新的适应症提供理论依据。方法:清洁级SD大鼠为研究对象,复方黄黛片混悬剂连续灌胃7天,每天1次。腹主动脉取血,电感耦合等离子质谱仪(ICP-MS)检测血清中砷浓度。血清药物浓度以砷含量计。5μg/ml含药血清作用于白血病K562细胞,24 h后观察细胞给药前后形态学变化。运用CCK-8方法检测不同浓度含药血清(0μg/ml,2.5μg/ml,5μg/ml,10μg/ml,20μg/ml,40μg/ml,60μg/ml)给药后12 h,24 h,48 h对白血病K562细胞的增殖抑制作用。Calcein-AM/PI荧光染色、AnnexinV-FITC/PI双染法检测不同浓度含药血清(0μg/ml,5μg/ml,10μg/ml,20μg/ml)对K562细胞凋亡的影响;Western-Blot检测凋亡相关蛋白Bax、Bcl-2、Caspase-3、Cleaved Caspase-3、Caspase-9、Cleaved Caspase-9在不同浓度含药血清(0μg/ml,5μg/ml,10μg/ml,20μg/ml)作用后的含量表达情况。结果:复方黄黛片含药血清中含砷浓度为1.532μmol/l。给药24 h后,K562细胞边缘模糊不清,细胞皱缩变小,中心出现破碎的物质,数量明显变少。CCK-8实验结果表明,不同浓度含药血清2.5μg/ml,5μg/ml,10μg/ml,20μg/ml,40μg/ml,60μg/ml作用12 h后对细胞增殖的抑制率分别为1.39%、3.43%、9.43%、15.72%、30.73%、50.34%;作用24 h后对细胞增殖的抑制率分别为4.33%,10.72%,36.24%,60.58%,71.73%,80.43%;作用48 h后,对细胞增殖的抑制率分别为9.76%,14.11%,48.72%,81.04%,88.65%,89.67%。Calcein-AM/PI荧光染色观察可见,随血清浓度增加,正常细胞数量明显减少,死亡细胞数量显著增加。AnnexinV-FITC/PI双染色法测得不同给药浓度为0μg/ml,5μg/ml,10μg/ml,20μg/ml时,凋亡率分别为0.9%,11.6%,31.5%,64.3%。含药血清组与对照组相比,凋亡相关蛋白表达均有改变,凋亡标志性蛋白Cleaved Caspase-3,Cleaved Caspase-9及Bax表达增加,Bcl-2,Caspase-3,Caspase-9蛋白表达下降,结果均有统计学差异。结论:复方黄黛片含药血清对K562细胞具有抑制增殖,诱导凋亡的作用。