超高效液相色谱—电感耦合等离子体质谱联用分析生物样品汞形态

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汞是一种重要的环境污染物,具有持久性和生物累积性等特点,在复杂的生物地球化学循环过程中以不同的化学形态存在于大气、土壤、水体生态系统中。汞的毒性和生物利用度与其形态紧密相关,因此,在评价汞的毒性效应和环境影响时,既要分析样品中总汞含量,也要分析其中不同汞形态的含量,以提供更全面的信息。使用常规反相色谱柱,常规流速雾化器,流速为0.35mLmin-1,进样量为3μL,可在13min内实现甲基汞,对氯汞苯甲酸,无机汞离子,乙基汞四种汞形态的分离检测,对应的检出限为0.28-0.93μgL-1,分析速度快。分析有证标准参考物IAEA-436和GBW10020,结果与参考值一致,证明了方法的准确性。随后使用该方法对不同抗汞基因的大肠杆菌进行了分析,比较了不同大肠杆菌在不同汞形态暴露后菌体内和营养液中的汞形态含量差异。筛选高特异性和降解效率高的大肠杆菌工程菌,以用于环境汞污染修复。本论文建立了一种基于毛细管色谱柱的超高效液相色谱-电感藕合等离子体质谱联用系统(UPLC-ICP-MS)的汞形态分析方法,并成功应用于水稻中汞形态研究,使用了低流速接口,流速为7μLmin-1,进样量仅为1μL,实现了微量生物样品中汞形态分析的目标。甲基汞的绝对检出限为0.28 pg,无机汞离子的绝对检出限为0.32pg,比常规的色谱绝对检出限提高了约40倍。分析有证标准参考物IAEA-436和GBW 10020验证方法的准确性。随后使用该方法对甲基汞暴露的水稻进行了实际样品分析,比较了根部和茎叶中汞形态的含量变化,并观察到在水稻生长的过程中出现了明显的去甲基化现象,为进一步研究汞在植物体内蓄积转化情况和生物毒性提供了方法。
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