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目的:1.研究补体的蛋白溶解片段在脑出血(intracerebral hemorrhage,ICH)后脑水肿形成中的作用;2.研究甲磺酸卡莫他特(Camostat Mesilate,CM)对补体激活过程中形成的蛋白溶解片段的影响;3.观察CM对ICH后脑水肿形成的抑制作用;4.探讨CM对ICH后脑水肿形成抑制作用的机制。方法:1.分组:将90只SD雄性大鼠随机分成假手术组、ICH对照组及CM治疗组,每组30只,每组分成6个观察时点,分别为术后12h、1d、2d、3d、7d、14d,每个时点5只大鼠。2.造模及给药:采用立体定向仪把自体血注入大鼠右侧尾状核制作大鼠ICH动物模型,术后两小时进行模型成功评价,治疗组于造模成功后胃内注入CM50mg/kg·d;ICH对照组于造模成功后每天胃内注入等体积生理盐水;假手术组的手术操作程序与ICH组相同,但尾状核不注入自体血,针留置约10分钟。3.术后各时点进行神经功能障碍评分。4.干湿法观察不同时点血肿周围脑组织含水量。5.放射免疫法测定不同时点血肿周围脑组织IL-1β、IL-6、TNF-α含量。6.比色法测定不同时点血肿周围脑组织非血红素铁含量。7.免疫组化法分析不同时点血肿周围脑组织补体片段C5a、C9表达情况。结果:1.假手术组、ICH对照组及CM治疗组术后各时点神经功能障碍评分变化: ICH对照组在术后12h～14d的神经功能障碍评分显著低于各相应时点的假手术组(P<0.05);在ICH对照组各时点,以术后2d的神经功能障碍评分最低,与术后3d相比无统计学意义(P>0.05),与该组其他时点差异有显著性(P<0.05);CM治疗组在术后12h～7d的神经功能障碍评分显著低于各相应时点的假手术组(P<0.05);CM治疗组在术后2d～7d的神经功能障碍评分显著高于各相应时点的ICH对照组(P<0.05)。2.假手术组、ICH对照组及CM治疗组术后各时点血肿周围脑组织含水量变化:ICH对照组在术后1d～7d的脑组织含水量显著高于各相应时点的假手术组(P<0.05);在ICH对照组各时点,以术后2d的脑组织含水量最高,与术后3d相比无统计学意义(P>0.05),与该组其它时点相比差异有显著性(P<0.05);CM治疗组在术后1d～3d的脑组织含水量显著高于各相应时点的假手术组(P<0.05);CM治疗组在术后1d～7d的脑组织含水量显著低于各相应时点的ICH对照组(P<0.05)。3.假手术组、ICH对照组及CM治疗组术后各时点血肿周围脑组织IL-1β含量的变化:ICH对照组在术后12h～3d的IL-1β含量显著高于各相应时点的假手术组(P<0.05);在ICH对照组各时点,以术后2d IL-1β含量最高,与该组其它时点相比差异有显著性(P<0.05);CM治疗组在术后12h～3d的IL-1β含量显著高于各相应时点的假手术组(P<0.05);CM治疗组在术后2d～3d的IL-1β含量显著低于各相应时点的ICH对照组(P<0.05)。4.假手术组、ICH对照组及CM治疗组术后各时点血肿周围脑组织IL-6含量的变化:ICH对照组在术后1d～7d的IL-6含量显著高于各相应时点的假手术组(P<0.05);在ICH对照组各时点,以术后2d IL-6含量最高,与该组其它时点相比差异有显著性(P<0.05);CM治疗组在术后1d～3d的IL-6含量显著高于各相应时点的假手术组(P<0.05);CM治疗组在术后2d～3d的IL-6含量显著低于各相应时点的ICH对照组(P<0.05)。5.假手术组、ICH对照组及CM治疗组术后各时点TNF-α含量的变化:ICH对照组在术后12h～3d的TNF-α含量显著高于各相应时点的假手术组(P<0.05);在ICH对照组各时点,以术后2d TNF-α含量最高,与术后12h、1d、3d时相比无统计学意义(P>0.05),与术后7d、14d相比差异有显著性(P<0.05);CM治疗组在术后1d～2d的TNF-α含量显著高于各相应时点的假手术组(P<0.05);CM治疗组在术后1d～2d的TNF-α含量显著低于各相应时点的ICH对照组(P<0.05)。6.假手术组、ICH对照组及CM治疗组术后各时点血肿周围脑组织非血红素铁含量的变化: ICH对照组在术后2d～14d的非血红素铁含量显著高于各相应时点的假手术组(P<0.05);在ICH对照组各时点,以术后14d非血红素铁含量最高,与该组其它时点相比差异有显著性(P<0.05);CM治疗组在术后2d～14d的非血红素铁含量显著高于各相应时点的假手术组(P<0.05);CM治疗组在术后2d～14d的非血红素铁含量显著低于各相应时点的ICH对照组(P<0.05)。7.假手术组、ICH对照组及CM治疗组术后各时点血肿周围脑组织补体C5a表达的变化: ICH对照组在术后12h～14d的补体C5a表达阳性细胞数显著高于各相应时点的假手术组(P<0.05);在ICH对照组各时点,以术后2d补体C5a表达阳性细胞数最多,与该组其它时点相比差异有显著性(P<0.05);CM治疗组在术后12h～14d的补体C5a表达阳性细胞数显著高于各相应时点的假手术组(P<0.05);CM治疗组在术后12h～7d的补体C5a表达阳性细胞数显著低于各相应时点的ICH对照组(P<0.05)。8.假手术组、ICH对照组及CM治疗组术后各时点血肿周围脑组织补体C9表达的变化:假手术组各时点均未见补体C9表达;在ICH对照组各时点,以术后1d补体C9表达阳性细胞数最多,与该组其它时点相比差异有显著性(P<0.05);CM治疗组在12h～7d的补体C9表达阳性细胞数显著低于各相应时点的ICH对照组(P<0.05)。9.直线相关分析:(1)ICH对照组:神经功能障碍评分与脑组织含水量、IL-1β含量、IL-6含量、TNF-α含量、补体C5a表达阳性细胞数、补体C9表达阳性细胞数均呈负相关;脑组织含水量与IL-1β含量、IL-6含量、TNF-α含量、补体C5a表达阳性细胞数、补体C9表达阳性细胞数均呈正相关;补体C5a表达阳性细胞数与IL-1β含量、IL-6含量、TNF-α含量均呈正相关;补体C9表达阳性细胞数与IL-1β含量、IL-6含量、TNF-α含量均呈正相关。(2)CM治疗组:神经功能障碍评分与脑组织含水量、IL-1β含量、IL-6含量、TNF-α含量、补体C5a表达阳性细胞数、补体C9表达阳性细胞数均呈负相关;脑组织含水量与IL-1β含量、IL-6含量、TNF-α含量、补体C5a表达阳性细胞数、补体C9表达阳性细胞数均呈正相关;补体C5a表达阳性细胞数与IL-1β含量、IL-6含量、TNF-α含量均呈正相关;补体C9表达阳性细胞数与IL-1β含量、IL-6含量、TNF-α含量均呈正相关。结论:自体血制作SD大鼠ICH动物模型,制作方法简单,易于操作,重复性好,与人ICH病理生理变化基本一致,可作广泛使用。在ICH后,血肿周围脑组织补体级联反应产生的补体溶解片段加重炎症反应,生成的膜攻击复合物(membrane attack complex,MAC)破坏红细胞,红细胞的代谢产物参与了ICH后脑水肿的形成。在ICH后,应用CM能改善其神经功能,减轻其脑水肿。CM可通过抑制蛋白酶而阻碍补体级联反应,从而减轻炎症反应和减少红细胞的破坏来发挥对ICH后脑水肿形成的治疗作用。