不同给药间距对胸腺五肽治疗重症肌无力的药效影响

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【目的】为了解决目前重症肌无力多种治疗方法的局限问题,本实验拟用免疫调节剂胸腺五肽(TP-5)通过对重症肌无力动物模型(EAMG)进行不同药量和用法的治疗来研究胸腺五肽的不同给药方式对药效的影响,进而探索TP-5疗效检测中对骨骼肌细胞内DNA含量、细胞膜流动性及膜上ATP酶、SOD酶等生物活性指标的建立。【方法】用乙酰胆碱受体(nAChR)的靶位点26肽片段免疫C57BL/6小鼠获得EAMG模型。在验证胸腺五肽不同药效时,EAMG模型分为四组,三个给药组及一个EAMG组,三个给药组分别以0. 125 mg/天/只,0. 25 mg/ 2天/只和0.5mg /4天/只腹腔注射TP-5溶液,给药期内各组小鼠接受的TP-5总量相同。持续给药两周后分别检测其CD4+、CD8+细胞数量。在进行生物指标建立时,对正常对照组、MG对照组及疗效最好的给药组检测其骨骼肌细胞内DNA含量、细胞膜流动性及膜上ATP酶、SOD酶活性。【结果】MG模型组的CD4+/CD8+比值明显高于正常对照组(P<0.01 )。三个给药组的CD4+/CD8+比值均在正常组和EAMG组之间,说明TP-5起到了调节作用。每日给药组的CD4+/CD8+值为1.037±0.402,仍然显著高于正常对照组的0.672±0.139 (P <0.01 ),而与MG模型组没有显著性差异;每隔4日给药组的CD4+/CD8+比值为0.952±0.253,比每日给药组更接近正常对照组,但与正常组及EAMG组均无显著性差异;隔日给药组的CD4+/CD8+比值0.832±0.115与正常对照组无显著性差异,而显著低于MG模型组的1.112±0.216 (P<0.05 )。在骨骼肌细胞指标中,MG模型组的DNA浓度和膜流动性均明显低于正常对照组(P <0.001 ),隔2日给一次TP-5后其指标恢复正常;骨骼肌细胞中的SOD活性则无论在正常组, MG模型组或TP-5组中均无差异;检测骨骼肌细胞膜上的Na+、K+-ATP酶和Ca2+-ATP酶活性显示MG模型组显著低于正常组(P <0.001 ),但TP-5治疗无助于提升MG模型组的ATP酶,反倒进一步降低其活性(P < 0.001)。【结论】MG明显使CD4+/CD8+比值升高,使骨骼肌细胞膜流动性和细胞膜上的Na+、K+-ATP酶及Ca2+-ATP酶活性降低,不影响骨骼肌细胞的SOD酶活性,却使细胞内DNA含量升高。TP-5治疗能使随MG病情加重而升高的CD4+/CD8+比值恢复正常,其免疫调节作用以每隔2日给药一次效果最佳。TP-5治疗还能使骨骼肌细胞内DNA含量和细胞膜流动性恢复至正常水平,对SOD酶活性不起作用,对ATP酶活性起到抑制作用。
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