兔严重烫伤早期血脑屏障开放的动态研究

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目的:血脑屏障(blood-brain barrier,BBB)是机体维持中枢神经系统内环境稳定的结构基础,创伤后血脑屏障的开放最终导致脑水肿的形成。本实验采用多种方法动态监测严重烫伤早期血脑屏障的开放情况,了解血脑屏障最早开放的时间、部位及其特征。方法:健康雄性新西兰大白兔,采用并改良我校全军烧伤实验所建立的致伤方法,建立50%Ⅲ度烫伤模型。伤后不作任何处理。采用125I标记的牛血清白蛋白(125I-BSA)作为示踪剂,观察严重烫伤早期血脑屏障的最早开放时间、部位。烫伤前经耳缘静脉注入125I-BSA,对照组、烫伤后各时相点放血活杀后取脑,按双侧前叶、颞叶、后叶皮质、小脑、脑干、基底节区,分别取部分脑组织块,称重,放射性计数,计算不同部位脑组织的比放射性。并与光镜、电镜所见镜下结构改变进行对比分析。采用高分辨率螺旋CT,通过测量平扫、增强时感兴趣区域脑实质平均CT值,观察不同时相点CT值的差异。在双侧前叶、颞叶、后叶皮质、小脑、脑干、基底节区选择固定的测定区域,应用CT机内固有的软件,测量各层面感兴趣区(ROI,0.3cm3)的平均CT值。通过增强前后CT形态学的变化,了解动物早期血脑屏障的开放情况。结果:光镜下示烫伤后2h,前叶皮质与小脑毛细血管轻度扩张、充血,周围间隙轻度增宽。烫伤后3h,少数神经细胞及少突胶质细胞轻度肿胀。烫伤后4h,各部位毛细血管、神经细胞和胶质细胞周围间隙增宽,神经细胞可出现空泡状改变。电镜下示烫伤后2h,部分基膜和胶质细胞足突稍肿胀,内皮细胞和胶质细胞周围水肿。烫伤后3h,血管内皮细胞、基膜和胶质细胞足突部分肿胀,血管内皮细胞紧密连接增宽、稍模糊。烫伤后4h,细胞肿胀更加明显,内皮细胞紧密连接模糊、甚至消失。125I-BSA离体实验发现:烫伤前、烫伤后1h、2h各部位的比放射性计数无明显差异,烫伤后2.5h示双侧前叶、小脑的比放射性计数较烫伤前有显著的增加(P<0.05),其它部位改变不明显。烫伤后3h,各部位的比放射性计数较烫伤前均有非常显著的增加(P<0.01),烫伤后4h比放射性计数持续增加。CT观察发现:烫伤后3h双侧前叶、双侧小脑增强后脑实质平均CT值,同烫伤前脑组织增强平均CT值相比有显著差异(P<0.05)。烫伤后4h,各部位增强后脑实质平均CT值,同烫伤前脑组织增强平均CT值相比差异非常显著(P<0.01)。烫伤后5h,有4例(26.7%)在增强后CT有形态学改变。烫伤后6h,有11例(73.3%)在增强后有CT异常改变,表现为脑实质的强化和/或脑<WP=7>池的强化。结论:1. 组织学证实:兔50%Ⅲ度烫伤后2h,双侧前叶和双侧小脑处血脑屏障出现开放;烫伤后3~4h,脑组织出现弥漫性血脑屏障开放。2. 兔50%Ⅲ度烫伤后2.5h,125I-BSA即可监测到血脑屏障的开放,观察到的血脑屏障开放动态趋势与组织学结果一致。125I-BSA测定微血管通透性,方法简便、测量简单,灵敏度高而且能精确地定量,可全面、确切地反映早期血脑屏障的病理变化。3. 兔50%Ⅲ度烫伤后3~4h脑组织增强后平均CT值,同烫伤前脑组织增强平均CT值相比有显著性差异(P<0.05)。提示CT可通过检测增强后脑组织平均CT值的变化,来监测血脑屏障的结构变化,对于血脑屏障开放的早期诊断有一定的意义。4. 兔50%Ⅲ度烫伤后5~6h,CT增强扫描可以出现CT形态学改变,主要表现为脑实质的团状强化。
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