目的:肝细胞癌（hepatpcellular carcinoma,HCC）是我国常见、多发、总体治疗效果不佳且预后较差的恶性肿瘤,给患者家庭及社会带来极大的负担。免疫调节点抑制剂（immune checkpoint inhibitor,ICI）治疗的发展为HCC患者带来了希望,ICI治疗联合其他小分子靶向药物或局部治疗让不可切除肝癌患者获益,但是,对ICI治疗的原发性及获得性耐受又限制其获益,因此,对HCC中ICI治疗靶标的信号通路调节机制的研究意义重大。程序性死亡配体-1（programmed death-ligand 1,PD-L1）是目前肝癌ICI治疗中最重要的靶标之一。干扰素-γ（interferon-γ,IFN-γ）通路调节PD-L1表达的作用已经被证实,而干扰素调节因子-1（interferon regulatory factor-1,IRF-1）作为IFN-γ通路中关键的转录因子,在HCC中调节PD-L1表达及肿瘤免疫的作用机制仍存在未知。本课题主要探讨IRF-1与PD-L1在HCC中表达的相关性,以及IRF-1对HCC肿瘤免疫的调节作用。研究将为HCC中ICI治疗靶点及相关肿瘤免疫的调节机制提供实验依据。方法:应用生物信息学技术分析癌症基因组图谱（The cancer genome atlas,TCGA）中IRF-1与PD-L1的表达以及肿瘤浸润免疫细胞的相关性;在临床收集的20例HCC患者癌和癌旁组织标本中,应用免疫组化技术（immunohistochemistry,IHC）,比较IRF-1与PD-L1、CD8、CD4、CD56及趋化因子CXCL10和CXCL11的表达水平的差异;选取正常肝细胞系（HL-7702、L-02）和肝癌细胞系（BEL-7402、HCCM、Huh-7）,应用聚合酶链式反应（PCR）分析相关基因表达水平;应用IRF-1过表达慢病毒转染肝癌细胞系Hep G2和Hep3B细胞,建立IRF-1过表达的稳定转染株（IRF-1组）,以及阴性对照细胞株（Negative Control,NC组）,实时荧光定量PCR（qRT-PCR）及蛋白质免疫印迹实验（Western Blotting,WB）检测各组细胞的IRF-1表达水平以及下游基因PD-L1、CCL5、CXCL9、CXCL10、CXCL11的表达水平;CCK-8法检测IRF-1过表达对肝癌细胞增殖的影响。结果:1、通过分析TCGA数据库中424例肝癌和正常肝脏组织标本中IRF-1与PD-L1表达的相关性,证实IRF-1与PD-L1的表达呈正相关;2、IHC检测证实肝癌与癌旁肝组织标本IRF-1及PD-L1蛋白的表达正相关,肝癌中IRF-1与PD-L1表达均低于癌旁组织;3、PCR结果发现肝癌细胞系的IRF-1 m RNA表达显著低于正常肝细胞系的表达;4、通过慢病毒转染的方式成功建立IRF-1过表达的肝癌细胞株Hep G2及Hep3B;5、qRT-PCR、WB实验证实IRF-1过表达细胞株PD-L1的m RNA水平和蛋白质水平表达上调;6、IHC结果显示,在肝癌与癌旁组织中CD8、CD56、CD4、CXCL10、CXCL11均与IRF-1呈正相关的关系,同时癌旁组织的CD8、CD56、CD4、CXCL10、CXCL11阳性表达明显低于肝癌组织;7、TCGA数据库中374例肝癌样本分析证实IRF-1与CD4和CD8的表达正相关;8、趋化因子CCL5、CXCL9、CXCL10、CXCL11的m RNA水平在IRF-1过表达的HCC细胞系中显著上升;9、CCK-8细胞增殖实验证实IRF-1过表达的Hep G2细胞和Hep3B细胞增殖率明显低于NC组,且与NC组对比排除了慢病毒对于细胞的影响。结论:IRF-1在HCC中对肿瘤免疫的调节具有双重作用:既能够上调HCC的PD-L1表达,也能够通过趋化因子的作用促进抗肿瘤免疫细胞的募集。