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目的 观察岛叶GABAB受体活性变化对大鼠空间再认记忆的影响,检测CREB表达水平,探讨岛叶GABAB受体在再认记忆中的作用及可能机制。材料与方法 SPF级雄性SD大鼠,体重200-240g,由宁夏医科大学实验动物中心提供,昼夜循环12/12h,避噪音单笼饲养。随机分为5组:正常对照组、巴氯芬组、CGP组、假手术组及生理盐水组,每组12只。(1)正常对照组:不予处理;(2)巴氯芬组:双侧岛叶置注药套管,每日行为学测试前双侧岛叶给予巴氯芬溶液;(3)CGP组:双侧岛叶置注药套管,每日行为学测试前双侧岛叶给予CGP溶液;(4)假手术组:仅双侧岛叶置注药套管;(5)生理盐水组:双侧岛叶置注药套管,每日行为学测试前双侧岛叶给予生理盐水。术后恢复两周开始空间记忆测试,每日测试前双侧岛叶内给药,Intellicage全自动智能监测系统持续观察大鼠空间记忆情况。行为学测试结束后分别断头取脑,剥离双侧岛叶组织,予-80℃冻存和灌注取脑后制冰冻切片。通过尼氏染色验证套管末端靶点,免疫组化和western-blot检测岛叶CREB表达情况。实验结果的数据采用均数±标准差(X±S)表示,数据分析采用单因素方差分析。先行方差齐性检验,组间差异统计学意义比较采用LSD-t检验,以P<0.05为差异有统计学意义。结果 (1)行为学检测:正常对照组、巴氯芬组、CGP组、假手术组及生理盐水组大鼠鼻触学习阶段成功饮水次数分别为16.7±3.7、3.6±1.4、10.1±2.8、15.7±2.3、15.9±2.8;巴氯芬组、CGP组与正常对照组饮水次数差异均有统计学意义(P<0.05)。正常对照组、巴氯芬组、CGP组、假手术组及生理盐水组大鼠位置学习阶段正确访问次数分别为20.5±5.5、3.5±2.3、12.7±6.1、19.3±6.1、19.1±5.5;位置逆转学习阶段正确访问次数分别为20.9±7.0、5.2±2.8、13.0±5.2、19.4±6.3、18.7±4.3,巴氯芬组、CGP组与正常对照组正确访问次数差异均有统计学意义(P<0.05)。新奇事物探索阶段访问LED角落次数分别为9.8±6.4、6.9±4.9、7.6±4.7、12.9±7.7、8.9±6.5,各组大鼠访问LED角落次数差异无统计学意义(P>0.05)。(2)免疫组织化学:神经元胞浆呈棕黄色为表达阳性。CREB在正常对照组、巴氯芬组、CGP组、假手术组及生理盐水组阳性细胞数分别为:36.4±3.8、26.0±9.7、63.2±8.7、38.6±5.9、41.0±6.6。巴氯芬组、CGP组与正常对照组CREB表达的差异有统计学意义(P<0.05);巴氯芬组与CGP组比较,CREB的表达明显降低(P<0.01);假手术组、生理盐水组与正常对照组之间CREB表达的差异无统计学意义(P>0.05)。(3)Western-Blot:使用分析软件Gel-Pro analyzer对结果进行分析,计算出各组的相对灰度值。CREB蛋白在巴氯芬组、CGP组与正常对照组、假手术组和生理盐水组的相对表达量分别为:1.00±0.11、0.53±0.10、1.61±0.12、0.98±0.09、0.99±0.10,巴氯芬组、CGP组与正常对照组CREB表达的差异有统计学意义(P<0.05)。结论 岛叶GABAB受体活性水平变化影响大鼠空间探索能力,过高表达或过低表达均损害大鼠的空间再认记忆,岛叶皮质CREB表达水平在其中起到重要作用。