【摘 要】
：
目的:阿尔茨海默病（Alzheimer’s disease,AD）是引起痴呆的主要疾病之一,明确其分子机制对于AD的诊断与治疗有重要意义。micro RNA（miRNA）是一类基因表达的转录后调节因子。目前,已有研究表明mi cro RNA与Aβ沉积、tau蛋白过度磷酸化、氧化应激以及线粒体功能障碍等AD机制有关。但是,micro RNA在AD病理机制中的作用尚不明确。本研究通过检测AD模型APP
论文部分内容阅读
目的:阿尔茨海默病（Alzheimer’s disease,AD）是引起痴呆的主要疾病之一,明确其分子机制对于AD的诊断与治疗有重要意义。micro RNA（miRNA）是一类基因表达的转录后调节因子。目前,已有研究表明mi cro RNA与Aβ沉积、tau蛋白过度磷酸化、氧化应激以及线粒体功能障碍等AD机制有关。但是,micro RNA在AD病理机制中的作用尚不明确。本研究通过检测AD模型APP/PS1双转基因小鼠海马组织中差异表达的m icro RNA及对其靶基因进行预测,并对靶基因进一步进行GO富集分析及KEGG信号通路分析。并探索有哪些micro RNA参与AD的发病机制,为AD的诊断与治疗提供新的靶点。方法:1.通过APP/PS1双转基因小鼠建立阿尔茨海默病模型。应用小鼠基因鉴定确定实现APP/PS1基因的双转,并通过Western blot及免疫荧光检测β淀粉样蛋白表达。2.利用miRNA测序（miRNA-seq）,检测APP/PS1双转基因小鼠组与对照组之间差异表达的miRNA。3.应用miRDB、Target Scan数据库对显著差异表达的miRNA进行靶基因分析,并进一步应用GO、KEGG实现靶基因的功能与通路的富集分析。4.通过实时定量荧光聚合酶链式反应（Real-time reverse transcription-quantitative Polymerase Chain Reaction,RT-q PCR）对APP/PS1组和对照组海马组织中miR-133a-5p、miR-297a-5p的表达差异情况进行验证。结果:1.AD动物模型的建立:基因鉴定筛选APP/PS1双转基因小鼠。应用Western Blot和免疫荧光证明,与正常对照组相比,在APP/PS1双转基因小鼠组海马组织中Aβ1-42沉积。且对Western Blot结果进行量化分析,两组之间的差异有统计学意义（P＜0.05）。2.micro RNA测序及差异表达miRNA的筛选:miRNA-seq共获得了1379个miRNAs,差异表达的miRNAs有598个。以︱FC︱＞1.5且P＜0.05为筛选条件,进一步筛选出的显著差异表达miRNAs有33个,其中,表达上调的miRNAs有15个,表达下调的miRNAs有18个。3.靶基因预测及功能性分析:对14个显著表达差异的miRNA进行靶基因预测,共获得722个靶基因,其中上调的有475个,下调的有247个。并进一步分别通过GO富集分析、KEGG信号通路分析靶基因参与的生物过程以及信号通路,所获得的靶基因主要集中在尼古丁成瘾、吗啡成瘾、谷氨酸能突触、癌症、脂代谢、钙信号、自噬等信号通路中。4.实时荧光定量PCR验证:应用RT-q PCR对miR-133a-5p及miR-297a-5p的表达进行验证,发现在APP/PS1小鼠中miR-133a-5p表达上调、miR-297a-5p表达下调。结论:1.通过miRNA-seq发现在APP/PS1双转基因小鼠中显著差异表达miRNAs有33个,其中,15个miRNA表达上调,18个miRNA表达下调。对这些miRNA进行靶基因分析,所获得的靶基因主要参与尼古丁成瘾、吗啡成瘾、谷氨酸能突触、癌症、脂代谢、钙信号、自噬等信号通路中。2.通过RT-qPCR对miR-133a-5p、miR-297a-5p进行验证符合预期结果,miR-133a-5p上调、miR-297a-5p下调可能参与AD的发病和发展机制,可能成为AD治疗的新靶点。
其他文献
目的:本研究通过PM2.5在线暴露系统,构建IL-37转基因鼠和野生型C57小鼠PM2.5暴露模型,研究IL-37在PM2.5暴露引起的气道高反应中的作用。方法:构建C57BL/6背景的IL-37转基因鼠（Transgenic TG）,将I L-37转基因鼠和野生型C57小鼠分为6组:野生型清洁空气组（wild ty pe-filtered air WT-FA）、野生型PM2.5组（wild ty
＜正＞中国移动通信集团江苏有限公司（简称中国移动江苏公司）以网格化运营改革作为“国企改革三年行动”重要抓手，深化网格治理、用人、激励“三项机制”改革，完善网格支撑体系，促进网格党建与经营深度融合，有效激发基层活力、动力，调动一线员工积极性、主动性和创造性，在中国移动集团2021年度“国企改革三年行动”重点任务考核中排名省公司第一。目前，
目的:探讨生物钟基因Bmal1是否通过调控细胞铁死亡影响高糖诱导的心肌损伤。方法:将野生型C57BL/6小鼠以及Bmal1基因敲除型C57BL/6小鼠,按对照组和模型组分组如下:（1）野生型对照组（WT组）;（2）野生型糖尿病组（WT+DM组）;（3）Bmal1基因敲除型对照组（KO组）;（4）Bm al1基因敲除型糖尿病组（KO+DM组）,每组小鼠数量大于等于6只。采用链脲佐菌素（strepto
目的:探讨SFRP5对异丙肾上腺素诱导的心力衰竭小鼠心功能的影响。方法:将雄性C57BL/6J小鼠随机分成四组:NS组、ISO组、ISO+PBS组和ISO+SFRP5组,每组6只。采用盐酸异丙肾上腺素梯度造模法建立心力衰竭小鼠模型。治疗组在注射异丙肾上腺素30min后腹腔注射0.02mg/kg/24h SFRP5重组蛋白,ISO+PBS组注射等量PBS液,连续给药14天。于最后一次给药结束后,行小
目的:糖尿病（diabetes mellitus,DM）病程延长后,会造成认知水平下降,以学习、记忆能力减退为主要症状。但其发病机制不明,且无有效的治疗药物。海马在记忆和学习中起着重要的作用。血脑屏障（blood brain barrier,BBB）是将中枢神经系统和外周循环隔离的结构,其完整性与海马功能密切相关。在血脑屏障的维持和形成中,周细胞（pericyte）是关键因素,可以调控内皮细胞增生
目的:研究行冠状动脉旁路移植术（CABG）术后C反应蛋白（CRP）浓度与术后出血量的临床分析,并探讨术后C反应蛋白（CRP）浓度与出血量的关系。方法:通过回顾性分析的方式对2019年01月至2022年01月在我院（河北医科大学第二医院）行冠状动脉旁路移植术（CABG）的204例冠状动脉粥样硬化性心脏病患者的临床资料,所有患者均通过严格的纳入标准和排除标准后分组。男性占157例,女性占47例,平均年
目的:本研究旨在探讨沙库巴曲缬沙坦联合胺碘酮对高血压合并阵发性房颤患者窦性心律的维持以及心功能、NT-pro BNP和MMP-2的影响。方法:本文采用前瞻性临床研究,连续选取2021年1月至2021年6月于河北医科大学第二医院心血管内科收治的高血压伴阵发性房颤患者90例,有50名男性患者和40名女性患者。将90例研究对象随机分为对照组（45例）和试验组（45例）。试验组中男性患者26例,女性患者1
目的 探讨在并发糖尿病的手术患者中实施手术室细节护理的应用价值。方法 选取2020年1月—2021年12月古田县医院收治的68例并发糖尿病的手术患者为研究对象，随机分为两组，各34例。对照组实施常规护理，观察组实施手术室细节护理，比较两组手术前后血糖指标、胰岛素功能改善情况、患者满意度。结果 术前，两组FPG、2 h PG以及Hb A1c水平比较，差异无统计学意义（P＞0.05）；术后，观察组FP
目的:结肠癌与肺癌、前列腺癌和乳腺癌一起被认为是世界上最常见的肿瘤之一。结肠癌常用的治疗方法是腹腔镜手术联合化疗,但是这种传统的治疗方式在治疗肿瘤的同时也给患者带来不可逆的伤害。近年来,手术辅助化疗在肿瘤治疗领域被认为是有效的,但是化疗药物的靶向性较差,杀死肿瘤细胞的同时又会破坏人体自身免疫系统的功能。为了解决传统治疗方式给患者带来的伤害,人们开始研究肿瘤治疗的新方式。由于实体瘤内缺氧以及独特的肿
目的:通过比较严重创伤患者入住EICU后24小时内的ISS评分、S OFA评分、APACHEⅡ评分以及炎症因子与凝血指标,找出影响严重创伤患者进展至脓毒症及预后的指标。方法:1.单中心、前瞻性研究。2.纳入2020年7月至2021年12月入住河北医科大学第三医院急诊重症监护室（EICU）的74例严重创伤（ISS≥16分）患者,根据治疗期间是否进展为脓毒症分为脓毒症组（n（28）28）与非脓毒症组（