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目的：本研究旨在探讨内质网应激(endoplasmic reticulum stress ERS)诱导雌激素受体阴性(estrogen receptor ERˉ)乳腺癌细胞凋亡以及钙蛋白酶2(calpain2)在其凋亡效应中的介导作用，为乳腺癌凋亡诱导治疗寻找靶点提供理论依据。 方法:采用ERˉ乳腺癌MDA-MB-231细胞为模型，常规细胞培养。实验设空白对照组(DMEM)、对照组(DMEM+DMSO)、实验组(DMEM+DMSO+TM)。用不同浓度(0、1.5、3、6、9、12μmol/L)内质网应激诱导剂衣霉素(Tunicamycin TM)诱导乳腺癌MDA-MB-231细胞不同时间(0、6、12、24、36、48h)，倒置显微镜下观察细胞形态学变化。采用Western Blot法检测ERS标志性蛋白葡萄糖调节蛋白78(glucose-regulated protein78，GRP78)的蛋白表达量，以GRP78表达量达到的最高点来确定细胞ERS的成功建立；检测ERS凋亡相关蛋白caspase4和CHOP表达以及calpain2及其内源性抑制酶calpastatin的表达。用内质网应激抑制剂四苯基丁酸(4-PBA)和calpain抑制剂(calpeptin)分别预处理细胞后，再观察对上述蛋白表达效应的影响。用MTT法检测细胞增殖抑制率和流式细胞术检测细胞凋亡率。 结果： 1)光镜下对照组细胞状态良好，形态饱满呈细长梭形，密度较大，随着诱导剂剂量增加，细胞密度减小，胞体皱缩变圆，碎片增多，并有大量细胞漂浮。 2)TM诱导乳腺癌细胞ERS时可见GRP78表达明显上调，以9μmol/L TM诱导细胞ERS24h的GRP78表达量最高，与对照组相比差异具有统计学意义(P<0.05)，作为细胞ERS建立的诱导浓度和时间，12μ mol/L以上的TM诱导细胞的GRP78表达量则表现明显下调； 3)MDA-MB-231细胞ERS发生时能上调calpain2、caspase4、CHOP的表达和下调calpastatin蛋白表达，与对照组相比差异均具有统计学意义(P<0.05)，其中 caspase4蛋白(P<0.01)； 4)用4-PBA或calpeptin预处理细胞2h后，再用TM诱导细胞，可见caspase4、calpain2蛋白表达的上调和calpastatin蛋白表达的下调均被显著阻断，与TM组相比差异均具有统计学意义(P<0.05)，其中caspase4蛋白(P<0.01)，CHOP表达也明显下调。 5)低剂量TM(1.5μmol/L)诱导乳腺癌细胞发生ERS时，细胞增殖抑制率及凋亡率分别为5％和12%，随着诱导剂剂量增大，增殖抑制率及凋亡率均明显增高，9、12、18μmol/L TM诱导的ERS对该细胞增殖有明显抑制效应，抑制率分别为(33.88±1.32)%、(51.51±8.85)%、(55.77±2.61)%，细胞凋亡率分别为[9μmol/L(16.70±0.46)%]、[12μmol/L(28.10±1.09)%]，与对照组相比均具有统计学意义(P<0.05) 结论： (1)较强或持续的ERS可诱导人乳腺癌MDA-MB-231细胞凋亡。 (2)calpain2上调caspase4和CHOP诱导MDA-MB-231细胞凋亡。 (3)ERS通过上调calpain2和下调calpastatin介导caspase4和CHOP诱导MDA-MB-231细胞凋亡。