猫瘟热病毒ELISA与HA/HI诊断方法和免疫原性及FPV疫苗金钱豹应用效果研究

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本研究从猫瘟热病毒、猫鼻气管炎病毒、猫鼻结膜炎病毒三联弱毒活疫苗中分离猫瘟热病毒弱毒株,通过对分离株进行病毒理化特性检测、双向琼脂扩散试验检测和病毒粒子形态电镜观察,最终确认从三联弱毒疫苗中分离到猫瘟热病毒,并以此分离株作为诊断抗原。阳性抗体用国产单联猫瘟热灭活疫苗免疫试验动物制备。通过对酶联免疫吸附试验(ELISA)的操作技术加以适当改进,使酶标板的吸附作用提高了80%以上,进而使临床用ELISA方法检测FPV的灵敏度得以大大提高。根据相关资料提供的方法,对HA/HI的操作方法做了改进,建立了一套适合用于临床检测FPV的HA/HI方法。检测结果显示,ELISA和HA/HI的吻合率达到93%以上。将ELISA和HA/HI两种血清学方法相结合,用于野生动物FPV的诊断,不仅克服了国内以往主要依靠流行病学、临床症状和病理变化等进行诊断的弊端;而且显著提高了临床检验的敏感性、特异性和可操作性。 以FPV分离株为材料免疫试验动物,检测其分离毒株的免疫原性。结果显示FPV具有良好的免疫原性,能够诱导机体产生坚强的体液免疫和细胞免疫。从不同种类疫苗免疫金钱豹后的结果可以看出,经一次免疫后弱毒活疫苗在第36w、灭活疫苗(单联或三联)在第23w的ELISA检测P/N仍可达到2以上,这为野生动物制定免疫程序提供了可参考的理论依据。
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