实验目的:间歇性低氧是阻塞性睡眠呼吸暂停综合症的重要特征之一,它能够引起认知功能障碍,但目前机制尚不明确。ROS作为氧化应激产物,参与多种神经退行性疾病的发生发展,包括阻塞性睡眠呼吸暂停综合症导致的认知障碍。研究证实,ROS能够引发神经细胞内脂滴堆积,导致神经元受损。本实验通过建立间歇性低氧的动物模型,检测小鼠海马区ROS的含量及脂滴堆积情况,研究脂滴堆积在间歇性低氧导致的认知功能障碍中的作用;同时设置丹参酸B提取物SMND-309治疗组,探索潜在的药物治疗方法。实验方法:将32只6周龄雄性C57BL/6实验鼠,随机分为4组,即正常组,模型组,毒性组和治疗组。其中模型组和治疗组的小鼠进行为期12个周的间歇性低氧处理,而正常组和毒性组的小鼠维持常氧状态。在第12周,于每日造模前给予毒性组和治疗组的小鼠腹腔注射SMND-309。造模完成后,依次完成三箱社交实验,水迷宫实验和恐惧实验等行为检测;再制备石蜡切片H&E染色和透射电镜样品,观察海马组织的病理学改变;通过冰冻切片尼罗红染色和BODIPY(493/503)染色验证脂滴堆积现象的存在;同时应用ROS含量检测试剂盒,免疫印迹技术和脂质过氧化特异性染料C11-BODIPY(581/591)染色等手段研究脂滴堆积造成的神经元损伤,探索可能的分子机制。实验结果:行为学实验数据表明,间歇性低氧处理导致的认知功能障碍主要表现在空间学习能力、空间记忆能力、社交记忆能力、情景记忆能力和线索记忆能力等方面。H&E染色和电镜结果说明了慢性间歇性低氧处理损伤了海马的神经元和胶质细胞,表现为:神经元排列紊乱,细胞肿胀,空泡化,细胞器崩解;胶质细胞水肿,细胞器缺失等。尼罗红染色、BODIPY(493/503)染色和免疫印迹技术证实间歇性低氧导致的脂滴堆积造成了严重的神经细胞损伤。通过C11-BODIPY(581/591)染色和ROS的检测进一步说明了在认知功能障碍的模型中,脂质过氧化也是脂滴导致神经元损伤的重要因素之一。结论:间歇性低氧诱发的高水平ROS促使脂滴堆积和脂质过氧化,造成神经细胞严重受损,从而引发小鼠认知功能障碍;SMND-309通过降低ROS水平,减轻了脂滴堆积和脂质过氧化导致的认知功能损伤。