氨基酸对妊娠小鼠子宫自发收缩的影响研究

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子宫不规律收缩是早产的最明显迹象,一般发生在妊娠早期和中后期,子宫平滑肌处于静止状态对于妊娠维持至关重要。大量研究表明,氨基酸对子宫平滑肌的收缩具有调节作用。本论文首先利用RM6240BD型多道生理信号采集系统对组氨酸(His)、精氨酸(Arg)、半胱氨酸(Cys)、谷氨酰胺(Gln)、异亮氨酸(Ile)苯丙氨酸(Phe)、甲硫氨酸(Met)、亮氨酸(Leu)和赖氨酸(Lys)等9种常见氨基酸在1、5、10mmol-L-1浓度梯度下对非妊娠期小鼠子宫平滑肌收缩的影响进行了研究,结果表明His在该浓度梯度下对非妊娠小鼠子宫肌条收缩的平均抑制率分别为29.0%、78.0%和100.0%;Arg为3.8%、32.6%和35.1%;Cys、Gln、Ile、Phe、Met分别在-9.3%~-91.6%、-7.0%~-44.0%、-1.0%~-107.4%、-2.8%~-27.7%和9.3%~-100.1%范围;而Leu和Lys的抑制率均小于±20%,说明Arg和His对非妊娠小鼠子宫平滑肌的收缩有明显抑制作用;Cys、Gln、 Ile、Phe和Met具有促收缩作用;Leu和Lys对非妊娠小鼠子宫平滑肌的收缩作用不明显。本论文进一步研究了Arg和His在0.1、0.5、1、2、5、10mmol·L-1浓度梯度下对妊娠中后期(15.5dpc)及产前期(17.5dpc和18.5dpc)孕鼠子宫平滑肌自发收缩的影响,得到在该浓度梯度下Arg对15.5dpc、17.5dpc和18.5dpc三个时期孕鼠子宫收缩的抑制率分别为(27.6±6.3)%~(100.0±0)%、(31.3±15.6)%~(52.4±17.7)%和(32.2±14.4)%~(69.4±9.3)%;His的抑制率为(34.0±5.3)%~(100.0±0)%、(21.1±2.8)%~(100.0±0)%和(26.5±11.5)%~(100.0±0)%,Arg和His在浓度达到5mmol·L-1时可以完全抑15.5dpc孕鼠子宫平滑肌收缩,不能完全抑制18.5dpc孕鼠子宫平滑肌收缩,His在浓度达到10mmol·L-1时可以完全抑制15.5dpc、17.5dpc和18.5dpc孕鼠子宫平滑肌收缩,而Arg在浓度达到10mmol·L-1时只能对15.5dpc孕鼠子宫平滑肌收缩产生完全抑制,表明Arg对15.5dpc孕鼠子宫收缩的抑制作用具特异性,并且不同时期孕鼠子宫对同一浓度氨基酸的敏感程度不同。本文还运用LC-MS/MS法测定了15.5dpc和18.5dpc两个时期孕鼠血清中Arg和His的浓度,得到15.5dpc孕鼠血清的Arg和His含量分别为(325.69±41.79) μmol·L-1和(139.70±67.07) μmol·L-1,18.5dpc孕鼠血清中Arg和His含量分别为(182.08±6.53)μmol·L-1和(117.4±24.53) μmol·L-1,结果表明两个时期孕鼠血清中这两种氨基酸生理浓度大小差异明显,在15.5dpc孕鼠血清中含量较高,有利于抑制孕鼠子宫收缩,18.5dpc孕鼠血清中含量均较低,有利于分娩发动,说明这两种氨基酸在小鼠妊娠的维持过程中发挥着重要作用,有可能作为妊娠中后期的维持药物来预防早产,由于Arg对15.5dpc孕鼠子宫收缩的抑制作用更具特异性,可能更适于作为妊娠中后期的抗早产药物,可为开发新型氨基酸抗早产药物提供实验基础和理论依据。
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